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【求助】SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE

gtwyx 慢病毒包装质粒SIN18-pRLL-hEFIap-EGFP-WRPE,求图谱。gtwyx-fd@163.com希望得到各位战友的帮助!freecell Write to author for it.http://www.nature.com/mt/journal/v3/n1/abs/mt200115a.htmlgtwyx 谢谢楼上的战友。我想知道国内有没有用这种三质粒系统的~~~本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷 ...

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【求助】求助:关于miRNA检测与锁核酸(LNA)技术

huangaiyou 看了一篇文章,说是用锁核酸技术大大提高了northern blot检测miRNA表达水平的灵敏度。请问各位站友,这个锁核酸技术用在northern blot上,如何检测的?也是用放射性同位素吗?似乎这个锁核酸只是增加了稳定性,跟最后的检测没什么关系吧?我现在想用northern blot验证预测的miRNA,又不能用同位素标记,请问有什么可以替代的吗?我曾经看到帖子说miRNA的检测要求灵敏度高,不用放 ...

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【求助】查一蛋白在不同器官组织的表达,用什么网站?

myskite 查一蛋白在不同器官组织的表达,用什么网站?slytjiaofei 看看这个是不是有帮助!!!http://bioinfo.wilmer.jhu.edu/tiger/ydh790214 请问有小鼠的组织特异性表达查询工具吗?多谢!本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号:shixiongcoming

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【求助】测序结果分析:应该对比的序列是看max score 最大的那个序列,还是max ident最接近的序列

shaoyibo 请问BLAST测序结果后,应该对比的序列是看max score 最大的那个序列,还是max ident最接近的序列?有人说是max score 最大的那个序列,可是我发现有好几个同样分值的,到底该如何看测序结果?请大侠指教,十万火急,多谢了lmnsmu 我认为首先看max score最大的序列,同样分值的好几个,说明你blast的序列可能是个保守序列,在同一类或家族的基因均有。你可以点blast的条形图,从上到下详细去了解。 ...

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【求助】请教一个单词的翻译:counterregulatory

oluckyo 出现在一篇文献的摘要中。按照文献内容,FXR配体加强了PPARgamma配体的作用。但作者总结时说:A FXR-PPARcascade exerts counterregulatory effects in HSCs activation.我理解counterregulatory的意思是相对的作用,反作用。那不是与文章意思矛盾了么?chenlinjie686 反调节oluckyo 反调节是什么意思?本文由丁香园论坛提供,想了解更多 ...

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【求助】构建载体时,何谓正向插入与反向插入

dxyqxl 麻烦问大家一下,构建载体时,何谓正向插入与反向插入啊,两者有何区别,跑胶以后的片段长度应该是一样的吧?谢谢各位啊!slytjiaofei 载体总的大小一样,但经过酶切后产生的片段长度有区别,不然怎么鉴定是正向还是反向,有的载体只有方向正确了才能进行下一步的转染表达,建议还是多看点相关的文章!阿呆硕士 一般的克隆型载体,其方向性就不是特别重要了,它关键的是目的片段的一个载体,最典型的没有方向性的就是T-A连接了。 ...

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【求助】miRbase数据是怎么回事?

freedegree release 14和release 13整个数据全变了,同一条miRNA,基因组中的位置变了,是什么原因?是基因组数据还是miRNA数据的变了?举一个例子:ID Chromosome Start End Strand releasehsa-let-7a-1 9 95978060 95978139 + 13.0hsa-let-7a-1 9 96938239 96938318 + 14.0zhujoker 楼主真是细心,但是你关心他们的位置有什么作用?我个人认为应该是 ...

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【求助】请问 加载控制是么,为什么要选用肌动蛋白?谢谢

shidingwen 请问 加载控制是么,为什么要选用肌动蛋白?谢谢freecell 请给出“加载控制”的英文说法。shidingwen 英文是这样表达的β-actin mRNA was used as a loading controlfreecell 晕。这里的意思就是将β-actin mRNA作为对照(或者内参)。loading是“上样,加样”的意思。β-Actin中文名叫做β-肌动蛋白,是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细胞骨架微丝的主要成分 ...

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【求助】请问pkc各亚型抑制剂有哪些

abbyalgernon 请问pkc各亚型抑制剂有哪些daixi421 我也想知道,希望博学人士给予帮助,谢谢ylhuang0502 下面网址堪称是关于PKC抑制剂的史上最全的网站,下翻至“Isozyme-Specific Protein Kinase C Inhibitors”即为著名的Calbiochem销售的PKC各亚型(多达10种亚型)抑制剂。http://www.pkclab.org/PKC/PKCbiology/PKCbiolo ...

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【讨论】究竟有多少疾病称得上是基因病呢?

njustzyy1283 极端一点讲,能不能说所有的疾病都是基因病呢?当然感冒发烧之类的细菌病毒引起的免疫反应应该明显不是了吧。没有分子生物学之前,什么肿瘤高血压糖尿病啥啥的,都是传统方法治疗。分子生物学兴起之后,这些疾病都能或多或少往基因突变上靠,能靠上的就说是单基因病,靠不上的就说是多基因病,因为变量太多所以确定不了相关基因。那哪些疾病是哪些不是呢?像肿瘤,引起机体翻天覆地的变化,一两个基因突变肯定是难免的啦。 ...

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【求助】miRNA的反义下调方面问题

syn2767 各位师兄,小弟做miRNA 的microdowm,但realtime检测antisence转染后,miRNA的表达并没用下调,问试剂公司的人说 antisence不能下调目的miRNA的表达,只有上调的质粒才能影响miRNA的表达,是这样吗,多谢!!slytjiaofei 我个人认为公司说的不太准确。利用反义核酸或siRNA抑制microRNA表达是一个很成熟的技术,当然效果如何取决于当初反义核酸或siRN ...

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【求助】测试p38功能变化仅测磷酸化的P38就可以了,为何还要测总P38呢?

伽利略 我一直都不太明白,请达人解释下,谢谢bigbang_0_0 蛋白质功能上的变化包括质变和量变两种,所以要检测总的p32蛋白水平。George2 测总P38是为了了解P38的表达背景,以估测激活的P38占总量的比例。伽利略 我是这样想的,请问有何问题P38磷酸化水平若增高不论是否P38总量变化,都能说明P38活跃或者激活,不测P38总量也可以。我看到不少刊物测试某些蛋白功能变化时只测了磷酸化水平,而未曾测该蛋白总量。侠骨 ...

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【求助】弱弱的问一下 真核生物基因序列在转录起始点之后翻译起始点之前的序列称作什么?

xiaoxiaoyu0329 查了很多资料都没有查出来,请您赐教,谢谢bigbang_0_0 帮顶:)jiajin 叫5'UTR,5'非翻译区song333 5' Un-Translated Regionpro2004 5'UTRxiaoxiaoyu0329 好的 谢谢各位的回复bigbang_0_0 不客气。zhuhoushun KAZARK吧吴佰霖 我想称为 转录非翻译区 更确切UTR的含义比较含糊,也可以指5'promoter 调控不转录的序列,也可以指转录了 但不翻译的 ...

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【求助】关于同源重组的原理,不解,求救!!!

lim1896 现在基因敲除技术里好多用的都是同源重组的方法!!!但是,为什么同源就会重组呢?看了好多书还没悟出来原因,而且,基因敲除过程中会有二次重组,这又是为什么呢???求解!!!bigbang_0_0 二次重组是Cre-依赖的条件性基因敲出范畴George2 下面的材料对理解同源重组很有帮助,供你参考1、概念基因敲除(geneknockout),是指对一个结构已知但功能未知的基因,从分子水平上设计实验,将该基因去除,或用其它顺 ...

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【求助】求助怎么用DNstare进行多序列比较呢,急,谢谢

jiuzili123456 手里有一个说明,但是没说多序列的。说的也不是很清楚希望知道的请指教,谢谢freecell 将所有序列按FASTA格式填好,放到一个记事本文件里。例如: DNA1AGGCTTTGAAAAGGGGGGGGGGGGGCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCTTTTTTTTTTTT然后在editseq中,file-import,导入这个记事本文件。然后软件就在这个记事本的存放位置,生成DNASTAR ...

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【求助】质粒有两个复制起始点,怎么复制呢?(red重组,pKD46质粒)

mnidr 我现在在做基因敲除,用的是red重组系统,pKD46质粒上携带有敲除所需的蛋白。pKD46质粒上有两个复制起始点Origin of Replication:repA101ts & oriR101 ;repA101ts是温度敏感型复制起始点。有几个问题请教:1.大家有用过这个pKD46的吗?oriR101是温度敏感型复制子还是条件诱导型复制子啊,我在网上查到它是温度敏感型复制起始点,我很不理解,为什么已经有一个温度敏感性 ...

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【求助】如何选择IκB抗体

science_sky 各位前辈,我接下来的实验要检测NFkB通路的活化状况,现在在订购抗体时遇到了问题:我准备订购IκB Antibody 和Phospho-IκB来反映NFkB通路的活化状况,发现Cell Signaling Technology提供了IκBα ,IκBβ ,IκBε和IκB-ζ和相应的磷酸化抗体,我应该订购那种亚型的抗体呢?希望前辈给于指点。00501101 你看你要做什么检测IκB抑制的是NF-kB哪两个亚基了。比如 ...

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【求助】促进自噬和抑制自噬均导致细胞死亡,怎么解释?

magichunter 我的药物本来是可以促进细胞凋亡的,后来想研究一下自噬和药物促进凋亡之间的关系。所以分别用自噬抑制剂3MA和促进剂Rapamycin与药物共同作用细胞。结果发现,无论是促进自噬还是抑制自噬,均导致细胞的死亡率比原来药物单独作用还要高,这应该怎么解释呢?为什么促进自噬和抑制自噬均增加了细胞的死亡?组别 存活率(1)正常细胞 100%(2)药物处理 57%(3)药物+3MA 36%(4)药物+Rapamycin 38%mag ...

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【求助】动物器官-20度存放了3个月了,还能提取mRNA做RT-PCR吗?

cpubio 如题。当时把器官取了放在-20度,由于有别的事情,一直没有做,不知现在处理还行不行?谢谢!song333 of coursemaomao030119 应该没得问题的cpubio 谢谢楼上两位回答。我赶紧开展工作,争取俩星期内完成这个工作。maomao030119 看来你又拖了一天jerryri -20度RNA一般能稳定1个月,现在放了3个月了,降解比较严重zhcosa 够呛了吧。。。。。lim1896 RNA不好说!!!本文由丁香园论坛提 ...

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【讨论】同一基因不同靶点或同一靶点的miRNAs之间是否存在竞争性结合

霍一刀hxs 不同的miRNAs可以靶定同一个基因,或同一位点或不同位点,那么,他们之间存在竞争性结合吗?弱弱地问一下,各位大侠。song333 possible, but the possibility is really low.each miRNA has its own target sequences, that mostly can be considered as sequence-specific targeting.maomao030119 应该会吧,个人观点本文由丁香园论坛提供, ...

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