多模式层析

复合模式层析原理

复合模式层析是一种集合多种类型的相互作用（如离子交换、疏水、氢键、嗜硫亲和等）于一种层析介质从而同时具备高选择性和高分辨率的层析技术。

图15 复合模式层析配基类型

 

特点

• 相较于传统层析模式具备更快的传质速率和更高的分辨率。
• 在高回收率条件下实现有效分离。
• 能够同时去除多种杂质，如多聚体、宿主蛋白、病毒、电荷异构体等。
• 适用于难以同时去除多种痕量杂质的层析需求。

 

层析介质

目前Cytiva共有四款复合模式层析介质：

• Capto™ Adhere系列可有效应用于两步法抗体纯化的精纯步骤。
• Capto™ MMC系列可直接用于发酵液的高盐上样，有效简化步骤，降低成本。
• Capto™ Core系列广泛应用于病毒、病毒样颗粒、病毒载体、外泌体等大粒径蛋白分离中。

 

不同层析介质之间的比较

1. Capto™ Core400 & Capto™ Core700

Capto™ Core是一种具有独特双层结构的多模式填料。其外层是5µm的钝化层，屏蔽了所有的结合位点并精准控制孔径。分子量大于700kDa或400kDa的生物大分子不能进入填料内部。其内层是多模式配基辛胺基，可吸附进入内部的蛋白质、核酸等物质。

图16 Capto™ Core填料示意图

2. Capto™ Adhere & Capto™ Adhere ImpRes

Capto™ Adhere是一种多模式的阴离子交换填料，其配基上除了带有正电荷外还具有氢键和疏水作用，可同时去除聚集体、DNA、病毒、脱落的Protein A配基等杂质。

3. Capto™ MMC & Capto™ MMC ImpRes

Capto™ MMC作为一种复合模式阳离子交换填料，其配基除了带有负电荷外还具备氢键、疏水作用和嗜硫作用。这赋予其对高盐溶液的良好耐受性和选择性。