石蜡切片苏木精-伊红(HE)染色法
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(1)切片在二甲苯中脱蜡5~10分钟。
(2)移入二甲苯和纯酒精(1∶1)混合液中5分钟左右(如经二次二甲苯脱蜡,此步可略)。
(3)入100%、95%、85%、70%酒精,各级为2~5分钟。最后经 蒸馏 水转入染液。
(4)苏木精染液染色5~15分钟。
(5)水洗玻片上多余染液,0.5~1%盐酸酒精(70%酒精配制)分色片刻。镜检控制,直至细胞核及核内染色质清晰为止,约数10秒钟。
(6)流水冲洗15~30分钟,或者在碳酸锂饱和液中短时间碱化或蓝化,即细胞核呈蓝色。
(7) 蒸馏 水短洗。
(8)0.1~0.5%伊红染液染色1~5分钟,若着色困难,可在每100毫升染液中加入1~2滴冰醋酸,使易着色且不易脱色。
(9)依次经70%、85%、95%、100%酒精脱水,各级为2~3分钟,在95%以下浓度的酒精中伊红易脱色,应适当缩短时间。
(10)二甲苯透明(二次),共约10分钟。
(11)封片:擦去切片周围多余二甲苯,切勿干涸,迅速滴加适量中性树胶,再加盖玻片封固。