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苏木精-伊红(HE)染色

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染液制备:

1.苏木精染液

(1)称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;

(2)加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;

(3)母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前宜过滤,去除氧化膜;

2.伊红染液

伊红有醇溶性与水溶性之分。将0.5g伊红溶于100ml70%乙醇或蒸馏水即成工作液;

染色步骤:

1.用37℃的温BSS漂洗3次,每次20s-1min;

2.用中性福尔马林固定30min;

3.用蒸馏水漂洗1次,再用蒸馏水稀释的苏木精液(1/20)染10min;

4.先用自来水冲洗几次,而后置入1%NaHCO3液中漂洗至蓝紫色;

5.在放入伊红水溶液中染30s-1min;

6.用蒸馏水冲洗,迅速通过丙酮2次,每次3-5min;

7.通过2:1丙酮/二甲苯3次,每次1-2min;

8.通过1:2丙酮/二甲苯3次,每次1-2min;

9.放入纯二甲苯5-10min,用光学树脂封片后观察

10.把盖片置载物玻片上,令小盖片细胞面向上,用树胶封存,再覆以较大盖片;

结果:

原代细胞核染成红色,胞质染成蓝紫色。

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