细胞增殖的检验方法:酸性磷酸酶法
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酸性磷酸酶法
1. 96 孔细胞培养板中培养细胞,去培养液。用 0.01mol/L PBS 洗涤 1 次(如为悬浮细胞则用离心洗涤)。
2. 去洗涤液后加入磷酸酶底物 100 μ l/ 孔。
3. 37 ℃,孵育 1 ~ 4h 。
4. 加入 0.1mol/L 氢氧化钠 10 μ l/ 孔。
5. 在多孔酶标仪上 405nm 处测光吸收度,将细胞培养板其中不含细胞,同样处理过的一孔作为空白对照,所测的每孔光吸收度可间接反应每孔中的细胞数。如在同样条件下作一细胞数的系列标准对照,以细胞数为 X 轴,光吸收度为 Y 轴,可作直线回归,可推算出每孔中的细胞。