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pc12培养经验

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1212

前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!
培养条件:PC12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于CO2培养箱(37℃,95%空气5%CO2),培养基选用DMEM(pH7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。
分化前:PC12细胞在培养基中多呈圆形,直径15~20μm,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。
分化后:加入NGF后的24h内细胞停止分裂,长出似交感神经元样的突起;第4~14d,细胞体积增大,突起增多并增长,形成网络,数周后,突起可长达500~1000μm(B图)。
NGF可促进PC12细胞向类似交感神经元样的形态分化,最终导致PC12细胞在生理、生化方面都具有神经元样的功能[12]。分化后的 PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍
有的战友提到分化的PC12药敏性更好是不是因为分化后的 PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍

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