pc12培养

丁香园myl0605的观点：

前几天为自己养的PC12是未分化还是分化型困扰,查了一些资料,现发上来希望能给有同样问题的战友有一点帮助!

培养条件:ＰＣ12细胞培养于铺有鼠尾胶原的玻璃培养瓶中,置于ＣＯ2培养箱(37℃,95%空气5%ＣＯ2),培养基选用ＤＭＥＭ(ｐＨ7.4,高糖),加入10%灭活小牛血清及5%灭活马血清。

分化前:ＰＣ12细胞在培养基中多呈圆形,直径15～20μｍ,也有椭圆或多角形的,扁平的细胞少见,倾向于聚集成小团簇状(A图)。

分化后:加入ＮＧＦ后的24ｈ内细胞停止分裂,长出似交感神经元样的突起;第4～14ｄ,细胞体积增大,突起增多并增长,形成网络,数周后,突起可长达500～1000μｍ(B图)。

NGF可促进PC12细胞向类似交感神经元样的形态分化,最终导致PC12细胞在生理、生化方面都具有神经元样的功能[12]。分化后的 PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍

有的战友提到分化的PC12药敏性更好是不是因为分化后的 PC12细胞对ACh的敏感性增大5~7倍

未分化

分化

我是用1640养PC12的,细胞状态很好.因为分化后的PC12贴壁很好,等培养液颜色发黄,直接倒掉培养液,在加入就好了,但一般那个时候就可以传代了!