养293、293T系列细胞的3点体会

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293细胞

1、尽量用早期的细胞，传代太多状态不好，产毒也不好，贴壁困难。

2、塑料的瓶子，DMEM +10%的小牛血清即可，要求并不高，ATCC上有详细的培养方法。

3、主要是传代，胰酶消化点到即止，不能和其它成纤维细胞一样。

最近的体会是：不用胰酶，轻轻吹打使细胞脱壁，然后将滴管前端插一个200ul的枪头，再吹打1min左右(有点费力)，肉眼看不见大的细胞团即可，此时显微镜下，可见细胞都分散开来，多数为单个，最多数个细胞，培养贴壁效果很好。因为枪头柔软，开口处小且规则，可以将细胞比较温柔地分开。