PBS相关资料

PBS的配制：

在800ml蒸馏水中溶解8g NaCL，0.2g KCL，1.44g 磷酸氢二钠和0.24克磷酸二氢钾，用HCL调节溶液的pH值至7.4，加水定容至1升，在1.034x10（5），高压蒸汽灭菌20分钟。室温保存。一般用于实验室中的PBS缓冲液都是这样配制，而不用摩尔分数表示。

PBS(Phosphate-buffered Saline) 分子克隆上的配方

NaCl: 8g

KCl: 0.2g

Na2HPO4: 1.44g

KH2PO4: 0.24g

溶到800ml蒸馏水中 盐酸调pH 到7.4 然后加水补充到1000ml，15磅20分高压灭菌 或者滤膜除菌 室温保存

免疫学手册上的配方：

0.23 g NaH2PO4(anhydrous：1.9mM)

1.15 g Na2HPO4(anhydrous：8.1mM)

9.00g NaCl（154mM）

加水 900 ml 调pH 7.2--7.4 再加水补充到1L

PBS的配方：

5X PBS stock solution

80 gm NaCl

2 gm KCl

21.72 gm Na2HPO4-7H2O

2 gm KH2PO4

add to total volume 2 L

adjust pH to 7.4

sigma公司的PBS

丁香园网友lits的问题：

我今天刚刚订了一个sigma公司的抗BRDU抗体的浓缩液，主要用来做脑组织的免疫组化，但是上面的一个说明我不得其解，求助各位高手：

Diluent：Phosphate buffered saline pH7.2-7.4 containing 1%BSA, 0.05%Tween 20 and 0.1% NaN3。

但是，我在院子里搜了一下，pbs的配方好像与上面提供的不一样，BSA，Tween 20 ，NaN3各是什么意思？做免疫组化用的pbs必须按照它的配方配置吗？

还有，如果就是按照sigma的配方，具体应该如何操作？谢谢！！

丁香园网友green_glh的观点：

BSA牛血清白蛋白，对蛋白有保护作用，Tween 20吐温20，存在于清洗液中，NaN3叠氮钠，是一种防腐剂。具体做法就是把上述试剂加入到配好的磷酸缓冲液里面就可以了。

丁香园网友drzjh的问题：

请问0.1mol/L PBS到底如何配制呀?

丁香园网友jessie2003的观点：

0.1mol/L PBS就是10倍的pbs，这个问题也曾经困扰了我很久，因为当时要用0.01mol/L的 PBS，多方查证才证实，我们平时免疫组化用的是就0.01的pbs,也就是一倍的pbs, 0.1mol/L PBS即10倍PBS的配方如下：氯化钠 8.5g,十二水磷酸氢二钠2.85克（二水磷酸氢二钠1.13克），氯化钾0.2克，磷酸二氢钾0.27克，蒸馏水100毫升。

丁香园网友mouse778191的观点：

我用的是：

水：1000毫升

十二水磷酸氢二钠：6克

二水磷酸二氢钠：0.4克

氯化钠：9克

PH一般在7.2－7.4之间，不用调的。

做组化很好，配多聚甲醛也可以的。

PBS磷酸盐缓冲溶液如何配制

0.05M储存液

Na2HPO4.12H2O－－66.15g

NaH2PO4.H2O－－6.66g

NaCl－－－－－100.00g

KCl－－－－－4.50g

加双蒸水至4500ml，用HCl或NaOH调PH到7.4即可。

使用时稀释5倍，即0.01M。

PBS(0.1M，pH 7.4)贮存液配方（10倍浓缩）

NaCl 80g

Na2HPO4.12H2O 32.3g

NaH2PO4.2H2O 4.5g

加蒸馏水至 1000ml

或者

NaCl 80g

Na2HPO4.2H2O 11.5g

KH2PO4 2g

KCl 2g

加蒸馏水至 1000ml

丁香园网友nevin的观点：

0.01M PBS液（PH 7.4）的配方：

A液：0.2M NaH2PO4 .2H2O 31.2g 加双蒸水至1000ml；

B液：0.2M Na2HPO4 .12H2O 71.6g 加双蒸水至1000ml；

0.2M PB液（PH 7.4）：19mlA液＋81mlB液 即得。

把这个0.2M PB液用NS稀释为0.01M PBS液(稀释20倍)

注意：配A、B液的目的是为了便于储存，我们称之为储存液。

丁香园网友yurihuahua的观点：

我们用于免疫组化PBS磷酸盐缓冲溶液配制是：

NaCl 8.00g/L

KCl 0.20g/L

Na2HPO4.12H2O 3.49g/L

KH2PO4 0.20g/L

称好后用双蒸水1L定容，再用精密PH计调PH为7.4

丁香园网友duyou的观点：

我做实验的配方： NaCl 8.0g, KCl 0.2g, NaH2PO4•H2O 1.56g, KH2PO4 0.20g，三蒸水1000ml

丁香园网友hanxing的问题：

请教大家，我都给搞糊涂了，PBS里有好几种试剂，不知道它们分别是以哪个为准计算的呢？？

丁香园网友songjingfeng21的观点：

PBS和0.01mol/LPBS配方NaCl  8.0 g

KCl  0.2g

Na2HPO4.12H2O  1.54g

KH2PO4  0.2g

加双蒸水至1000ml，

PBS和0.1mol/LPBS配方NaCl  8.5g

Na2HPO4.12H2O  30.8g

KH2PO4.2H2O  2.8g

加双蒸水至1000ml

丁香园网友seagull1998的观点：

KH2PO4 2G

KCL 2G

NACL 80G

NAH2PO4.2H2O 11.44G

1undefined PH 7.4 加水至1升，AUTOCLAVE后使用。根据情况稀释到undefined或其他*。可用于rna试验。

50mmol/L PBS配方：

Nacl 4.25克

Na2HPO4.12H2O 15.4克

NaH2PO4.2H2O 1.4 克

双蒸水 定容至 1000ml

NaCL的量并不是固定不变的，而是随所配溶液的浓度和体积而改变的。

正常的PBS的配方中是不加入KCL的，除非是因为你有特别的需要而额外加入的！

PS : 之所以大家都配储备液，是因为低浓度的PBS保存时间不宜过长，反复开盖取用对溶液的浓度及其离子成分有影响，而储备液则可长期保存，并可根据所需要的浓度随时稀释。

丁香园网友feiqi的问题：

我要做脑组织的免疫组化，但是发现不同的人用的PBS的浓度和配方不同。清高手谈谈PBS的用途和标准配方。丁香园

丁香园网友tony999的观点：

PBS类似于临床上用的生理盐水，离子浓度恐怕不能随意变动吧，我们培养细胞用的pbs配方是：Nacl 8.5g，Kcl 0.2g，Na2HPO4(12H2O) 2.58g,KH2PO4 0.27g,溶于1000ml双蒸水中，用时需灭菌

此溶液ph值是7.2

丁香园网友琴逢笛手的问题：

0.1M的PBS和0.01M的PBS有什么不同？这个浓度指的是磷酸根的摩尔浓度吗？同样是平衡盐溶液，浓度相差10倍在应用上有什么不同吗？

丁香园网友welcome2008的观点：

只能回答上一个问题，这个浓度指的就是磷酸根的摩尔浓度。

浓度低缓冲能力就低一些，但是可以避免离子浓度过高对实验的影响。

丁香园网zhyucn的观点：

0.01M的PBS常用于组织切片的漂洗，而0.1M的PB或PBS可用于组织灌流时的溶剂。当然后者的缓冲能力强了。

丁香园网友bahai的问题：

0.2M/L的PBS溶液1000ML，用蒸馏水稀释到2000ML,请问浓度是0.1M/L吗？

若是NaCl溶液遇到上述情况，肯定应该是变为0.1M/L了，但是PBS缓冲液也是一样吗？

丁香园网jessie2003的观点：

0.2M/L的PBS溶液1000ML，用蒸馏水稀释到2000ML,浓度就是0.1M/L的。

我们平时多配成0.1M的，而平时用的时候多用0.01M的，稀释十倍就行了。

丁香园网友liguimin的问题：

请问哪个公司的PBS粉价格质量都说的过去？？

丁香园网home的观点：

武汉博士德的还可以，4元/包/2L

丁香园网友zxwk2004的问题：

PBS片(市售的一片配100ml)怎么配成0.1和0.01mol/L的PBS溶液???

丁香园网北国木棉的观点：

PBs里面的成份有好几种，一般是按照不同的盐的成份来调节PH值的不同。似乎没有听过有摩尔数的变化。

丁香园网tianx775的观点：

PBS片确实是有卖的， 美国Amresco 公司生产，北京经科宏达生物技术有限公司有售。是说1片溶于100ml，但是没有浓度，建议订购时先向他们询问！！

如果实在不行就自己配就是了。

0.1mol/L 的PBS配方如下：

Nacl 8.5克

Na2HPO4.12H2O 30.8克

NaH2PO4.2H2O 2.8 克

双蒸水 定容至1000ml

稀释十倍即为0.01mol/L 的PBS.

丁香园网友luxboy_6x的问题：

我要做将大鼠骨髓干细胞输入大鼠体内的实验,在对照组中给大鼠输入PBS还是生理盐水,我和导师有不同观点,我的导师认为:因为在筛选骨髓干细胞的步骤中有反复多次的PBS冲洗,故为取得比较好的对比,应该选用PBS;而我认为用生理盐水合适,因为参照很多文献上,他们的对照组也是给大鼠输入的是NS,而且NS的渗透压与生物体内的渗透压差不多,对生物体的影响不是很大.我想请教的是PBS输入体内对生物体是否有影响?和NS比较,在对照实验中哪个更合适?其实我的老板对自己的观点也不是很坚定的.

丁香园网qxlbljys的观点：

两个均可以，没有大的差别，应该是用PBS更有对比性，因为你是用做阴性对照的，应和筛选骨髓干细胞时用的PBS一致，PBS也不会影响动物的。

丁香园网友zhenyueqiao的问题：

我按照师姐的配方配PBS,据说配出来就是PH7.4,但我使用PH计测了之后是7.8,请问在做TTC染色时还要调到7.4吗,能用盐酸调PH吗?

丁香园网cma1954的观点：

不能！这样会破坏缓冲能力！介绍一个配TTC的PBS（pH7.4）：

配制0.1mol的Na2HPO4和NaH2PO4，按81%和19%混合。如pH不满意，微调一下两者比例，如出现你的情况，可将NaH2PO4比例提高些。

丁香园网友zhang_yanli的问题：

这几天配PBS，每次配完后感觉溶液挺清亮的，高压完以后就会出现白色沉淀物，开始以为是瓶子没洗干净，然后就用刚泡完酸（酸也是刚配的），干烤完的瓶子用的水是蒸馏水，还用了次三蒸水，，还是会有沉淀，连续四五次都这样，以前没出现过，是怎么回事呢？

丁香园网coven的观点：

正常的，自己配的PBS高压后是会有沉淀的。所以你可以用0.22um的滤器过滤的。

我们一般是先配10×的PBS，用0.22um的滤器过滤后储存。待需要时，稀释成1×的，然后高压，感觉好一点。

丁香园网liujian的观点：

除了与试剂有关外，与水也有很大的关系，不知道楼主用的是什么水？有一次我们实验室的纯水仪的虑芯该换了，用这样的水配出来的PBS高压时就很容易出现沉淀！然后我换了用蒸馏器烧的三蒸水后就没有沉淀了！

后来我们干脆就配成5×或10×的常温保存，用灭菌3蒸水稀释后再用。

10×的PBS在4度保存的确会析出，5×的就不会析出！室温下都不会析出！