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简并PCR

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1691

简并PCR 就是引物合成的时候
在某个位置用两种以上的碱基代替原来的单碱基渗入oligo链
合成的是一堆混和物
实际上能够起做用的在其中占一定比例
这个比例一般用简并度表示
比如agctN合成的时候最后一位用4种碱基
反应真正用的agctc,占总数的1/4
agctNN其中agctCC就占1/16
一般公司推荐3‘端尽可能少的简并
而且有效引物在总数中不能低于一定比值
简并太多宁可多设计几条引物
也有用次黄代替AGCT四种的,不过价格昂贵,一般很少用

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