石蜡切片中组织切片染色不均匀、模糊不清的原因及解决办法

1. 1 　原因

(1) 脱蜡时间不足或二甲苯由于使用过久,浓度降低,致使组织切片内蜡未彻底脱净.

(2) 取材时部份组织受挤压或取材后未及时固定.

(3) 浸蜡时温度过高,超过68 ℃.

(4) 切片组织内有水分.

1. 2 　处理方法

(1) 脱蜡的二甲苯要定期更换,脱蜡时间宁长勿短;在冬季,特别是室温在20 ℃以下时,染色前首先将切片放置温箱中预热,使切片上石蜡熔化,再投入二甲苯中脱蜡,或将二甲苯稍加温后再脱蜡〔1〕.

(2) 取材时切勿挤压组织,取材后立即固定.

(3) 浸蜡时温度必须控制在62 ℃～64 ℃.

(4) 脱水酒精定期更换,严格密封,防止水分吸入而降低无水酒精的浓度,造成脱水不佳,且封片速度要快.

(5) 载玻片和盖玻片必须清洗干净.