【求助】关于GPCR与钙离子浓度测定

丁香园论坛2015-08-21

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zhanghai123

大家好！
我最近在做测定一种GPCR是否会引起细胞内钙离子浓度波动的实验。我是用共聚焦去测定，通过C3染料来检测。请问，在GPCR被配体激动后，假如我的GPCR是偶联Gaq的，一般多长时间就可以引起细胞内钙离子波动？我是直接在共聚焦上先用含钙PBS去测基线，之后洗掉PBS，直接加含药的PBS，然后开始测，5秒钟测一次。不知道这样时候正确。
谢谢高手指教！

kern6549

共聚焦检测很难实现定量，不适合你的实验。
建议用流式细胞术检测细胞内游离钙离子浓度的方法。

zhanghai123

我们的共聚焦可以做曲线的，因该是可以检测的。而且文献上也是这么报道的。

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