【求助】关于GPCR与钙离子浓度测定
丁香园论坛
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大家好!
我最近在做测定一种GPCR是否会引起细胞内钙离子浓度波动的实验。我是用共聚焦去测定,通过C3染料来检测。请问,在GPCR被配体激动后,假如我的GPCR是偶联Gaq的,一般多长时间就可以引起细胞内钙离子波动?我是直接在共聚焦上先用含钙PBS去测基线,之后洗掉PBS,直接加含药的PBS,然后开始测,5秒钟测一次。不知道这样时候正确。
谢谢高手指教!
我最近在做测定一种GPCR是否会引起细胞内钙离子浓度波动的实验。我是用共聚焦去测定,通过C3染料来检测。请问,在GPCR被配体激动后,假如我的GPCR是偶联Gaq的,一般多长时间就可以引起细胞内钙离子波动?我是直接在共聚焦上先用含钙PBS去测基线,之后洗掉PBS,直接加含药的PBS,然后开始测,5秒钟测一次。不知道这样时候正确。
谢谢高手指教!
共聚焦检测很难实现定量,不适合你的实验。
建议用流式细胞术检测细胞内游离钙离子浓度的方法。
建议用流式细胞术检测细胞内游离钙离子浓度的方法。
我们的共聚焦可以做曲线的,因该是可以检测的。而且文献上也是这么报道的。
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