酵母双杂交资料

我要做酵母双杂交，有战友在做吗，交流一下，我的QQ446357706，现在我先把我的资料给大家看看吧，我自己写的程序

酵母培养：

YPD: 蛋白胨20g ,酵母提取物10g ,琼脂20g

葡萄糖20g或灭菌后加入葡萄糖（40% 50ml；过滤除菌/121℃,15min）,使终浓度为2%

YPDA: YPD+adenin hemisulfate(0.2% 15ml;对热不稳定，不能高温高压灭菌)，使终浓度为0.003%.

SD /:（SD /完全，SD /-./././.）

无氨基酸酵母氮源 6.7g , 琼脂 20g ,

缺相应氨基酸的培养基 所要求的质量（-Ade/-His/-Leu/-Trp DO Supplement:0.6g;

-Leu/-Trp DO Supplement:0.64g;

DH2O 850ml， -Leu DO Supplement:0.69g）

超净台内加入所要补充的氨基酸 （Ade，His，Leu，Trip）10×Dropout solution 100ml ,

葡萄糖 20g或灭菌后加入葡萄糖（40% 50ml；过滤除菌/100~110℃,30min）,使终浓度为2%.

成分 10×贮存液浓度（g/L;mg/100ml） 1L培养基所需贮存液体积(ml)

腺嘌呤硫酸盐（adenine hemisulfate salt） 0.2 ;20 100 ml

注：

1．高压灭菌，4℃保存一年

2．丝氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，酵母可内源性合成。

但AH109在-Met上时，应加入天冬氨酸（10×天冬氨酸，1000mg/L
L-精氨酸LiCL（Arg HCL） 0.2 ;20
L-组氨酸HCL（His HCL monohydrate） 0.2 ;20
L-异亮氨酸（Isolwucine） 0.3 ;30
L-亮氨酸（Leucine） 1 ;100
L-赖氨酸HCL（Lysine HCL） 0.3 ;30
L-甲硫氨酸（Methionine） 0.2 ;20
L-苯丙氨酸（Phenylalanine） 0.5 ;50
L-苏氨酸（Threonine） 2 ;200
L-色氨酸（Tryptophan） 0.2 ;20
L-酪氨酸（Tyrosine） 0.3 ;30
尿嘧啶（Uracil） 0.2 ;20
L-缬氨酸（Valine） 1.5 ;150