PVDF膜上蛋白的可逆染色的几种方法
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Western杂交时,为确认蛋白是否转至PVDF膜上,可用下列方法对膜上蛋白进行可逆性染色。
1. 氨基黑染色
染液:0.5% Amido Black (w/v), 25% isopropanol (v/v) and 10% acetic acid.
染色:将PVDF膜置于染液中染色数钟,ddH2O 脱色。
2. 考马氏亮蓝染色
染液:0.1% Coomassie Brilliant Blue R-250 (w/v) and 50% methanol (v/v)
脱色液:40% methanol (v/v) with 10% acetic acid (v/v)
染色:将PVDF膜置于染液中染色15 min.,脱色液脱色。
3. 丽春红染色Ponceau S
染液:0.2% w/v Ponceau S in TCA (3% v/v)
染色:将PVDF膜置于染液中染色5min
脱色:ddH2O 脱色