原理
丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时也可以与蛋白质的非极性区相结合，从而形成红色的条带。
材料与仪器
蛋白
AmidoBlack isopropanol aceticacid 考马斯亮蓝 methanol Ponceau S in TCA EtOH HAC Na2S2O3 AgO3 Na2CO3 MeOH AgNO3 甲醛
PVDF膜
AmidoBlack isopropanol aceticacid 考马斯亮蓝 methanol Ponceau S in TCA EtOH HAC Na2S2O3 AgO3 Na2CO3 MeOH AgNO3 甲醛
PVDF膜
步骤
1. 氨基黑染色
染液：0.5% Amido Black （w/v）， 25% isopropa nol （v/v） and 10% acetic acid.
染色：将 PVDF 膜置于染液中染色数钟，ddH2O脱色。
2. 考马斯亮蓝染色
染液：0.1% Coomassie Brillia nt Blue R-250 （w/v） and 50% met hanol （v/v）
脱色液：40% met hanol （v/v） with 10% acetic acid （v/v）
染色：将 PVDF 膜置于染液中染色 15 min.，脱色液脱色。
3.丽春红染色 Ponceau S
染液：0.2% w/v Ponceau S in TCA （3% v/v）
染色：将 PVDF 膜置于染液中染色 5min
脱色：ddH2O脱色
注意事项
丽春红染色液不适用于尼龙膜上蛋白的检测。
常见问题
丽春红的染色灵敏度不如考马斯亮蓝染色液。
来源：丁香实验
