3 种 HE 染色方法比较

在病理学实验课中，要观察大体标本和镜下标本，为了能更好的掌握实验课中所学的知识和内容，尤其是镜下标本，熟悉病理组织的制片技术是非常重要的，这对能否看好切片有很大帮助，它是教学、医疗、科研中必不可少的重要组成部分。

染色原理和机制尚无定论，处于学说阶段。可能既是化学反应，又有物理作用参加。从化学角度看，动物或植物细胞内，一般有酸性和碱性部分的区分。含有酸性物质的部分能与溶液中的阳离子结合，含有碱性物质的部分能与溶液中的阴离子结合。

例如细胞核，特别是核内的染色质，一般认为是酸性物质组成的，其中主要是核酸，故它与碱性染料的亲和力很强，易于染色，例如氧化苏木素铬盐因为碱性燃料中的碱性部分有染色作用的是阳离子，而细胞浆则相反，它含有碱性物质和酸性染料的亲和力很大易于染上它的颜色，如伊红，因为是酸性染料中的酸性部分有染色作用的是阴离子，所以细胞核为碱性染料苏木素所染，细胞浆为酸性染料伊红所染。细胞内核的染色质、粘液和软骨的基质多染碱性染料。

但必须注意的是，嗜碱性和嗜酸性是相对的而不是绝对的，若细胞在盐基性染液内置留过久，胞浆也可着上盐基性染料的颜色。相反，若细胞浆在酸性染液内置留过久，胞核也能着色。从物理角度看，在染色过程中，染液中的色素微粒子浸入到被染组织的粒子间隙内，此时，因受到分子的引力作用，色素微粒子被吸附而着色。

由于各种组织有不同的吸附能力和不同的吸附程度，因此就可显出来不同的颜色来。本实验主要针对常规 HE 染色方法的不足，从固定剂的特性、用量、染色剂用量和染色方法、染色条件等几个方面加以调整和改良，找出效果比较理想的切片染色方法。实验采用苦味酸和福尔马林两种方法来固定，改良 Harris 法、改良 Mayer 法、改良 Lillie-Mayer’ 三种HE染色方法, 两种伊红染液（ 0.7% 酸化伊红和 0.5% 水溶性伊红染液）进行实验。

一、实验材料

新西兰大白兔两只，分别为 2.8kg 和 2.7kg。

二、 主要试剂

70% 酒精，80% 酒精，95% 酒精，无水酒精，蒸馏水，苦味酸，苏木素，硫酸铝钾，红色氧化汞，冰醋酸，甘油，碘酸钠，钾明矾，浓盐酸，碳酸氢钠，硫酸镁，二甲苯（固定液），伊红 Y ，1% 稀氨水，浓度为 10％ 的甲醛固定液，石蜡，试剂均为分析纯。

三、用品与仪器

烧杯（1000 ml 100 ml 50 ml ），量筒（1000 ml 10 ml），漏斗，滤纸，玻璃棒，移液管，洗耳球，载玻片，盖玻片，滴管 ，镊子，解剖刀，标签纸等。