HE 染色法

HE 染色也称苏木精-伊红染色，它是常规染色。苏木精是一种天然染料，它本身并不能染色，在经氧化后变成苏木红才是真正的染料，苏木对细胞核的亲和力并不强，而在媒染剂的帮助下才能较好显示细胞核，此时细胞核呈红色，只有在碱性环境中，苏木才变成蓝色。伊红 Y 是人工全盛染料，它可能是通过渗透或弥散作用完成染色的，因此和组织万分结合是不牢固的。它对细胞质着色。

肿瘤细胞，福尔马林，BSS，蒸馏水，苏木精液，伊红染液，丙酮，二甲苯；光学显微镜，树胶，载玻片，盖玻片，洗瓶，离心机，离心管。

一、具体操作

1、准备组织切片。

2、37 ℃ 温 BSS 漂洗 3 次，每次 2~3 min。

3、中性福尔马林固定 30 min。

4、蒸馏水漂洗 1 次。

5、用蒸馏水稀释的苏木精液（1/20）染 10 min。

6、自来水洗。

7、置人 1% NaHCO₃ 液中漂洗至蓝紫色。

8、伊红染液染 30 s-1 min。

9、蒸馏水洗。

10、迅速通过丙酮 2 次，每次 3~5 min。

11、通过 2:1 丙酮-二甲苯 3 次，每次 1~2 min。

12、纯二甲苯 5~10 min。

13、树胶封片，即可镜检。

二、结果评价

细胞核染蓝紫色，细胞质桃红色。组织细胞排列紧密，凋亡细胞与正常细胞分离，胞核皱缩，但因与组织分离，凋亡细胞略显大。

1、整个操作动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞。

2、操作时注意避光，反应完毕后尽快在一小时内检测。

肿瘤细胞一般体积大，是正常细胞的 3 倍以上，核大，核畸形怪状，染色深和分裂相多见，而且多见病理性核分裂相，肿瘤细胞排列松散，容易脱落。肿瘤细胞核浆比例失调，细胞浆染色改变，或者出现空泡，癌细胞背景则是多有坏死。光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息的光学仪器。通过光学显微镜检测肿瘤细胞形态有两种方法：HE 染色法和瑞氏和杰姆萨混染法。