原理
HE染色也称苏木精-伊红染色，它是常规染色。苏木精是一种天然染料，它本身并不能染色，在经氧化后变成苏木红才是真正的染料，苏木对细胞核的亲和力并不强，而在媒染剂的帮助下才能较好显示细胞核，此时细胞核呈红色，只有在碱性环境中，苏木才变成蓝色。伊红Y是人工全盛染料，它可能是通过渗透或弥散作用完成染色的，因此和组织万分结合是不牢固的。它对细胞质着色。
材料与仪器
肿瘤细胞
福尔马林 BSS 蒸馏水 苏木精液 伊红染液 丙酮 二甲苯
光学显微镜 树胶 载玻片 盖玻片 洗瓶 离心机 离心管
福尔马林 BSS 蒸馏水 苏木精液 伊红染液 丙酮 二甲苯
光学显微镜 树胶 载玻片 盖玻片 洗瓶 离心机 离心管
步骤
一、具体操作
1. 准备组织切片。
2. 37℃温BSS漂洗3次，每次2-3 min。
3. 中性福尔马林固定30 min。
4. 蒸馏水漂洗1次。
5. 用蒸馏水稀释的苏木精液（1/20）染10 min。
6. 自来水洗。
7. 置人1%NaHCO3液中漂洗至蓝紫色。
8. 伊红染液染30 s-1 min。
9. 蒸馏水洗。
10. 迅速通过丙酮2次，每次3-5 min。
11. 通过2:1丙酮-二甲苯3次，每次1-2 min。
12. 纯二甲苯5-10 min。
13. 树胶封片，即可镜检。
二、结果评价
细胞核染蓝紫色，细胞质桃红色。组织细胞排列紧密，凋亡细胞与正常细胞分离，胞核皱缩，但因与组织分离，凋亡细胞略显大。
1. 准备组织切片。
2. 37℃温BSS漂洗3次，每次2-3 min。
3. 中性福尔马林固定30 min。
4. 蒸馏水漂洗1次。
5. 用蒸馏水稀释的苏木精液（1/20）染10 min。
6. 自来水洗。
7. 置人1%NaHCO3液中漂洗至蓝紫色。
8. 伊红染液染30 s-1 min。
9. 蒸馏水洗。
10. 迅速通过丙酮2次，每次3-5 min。
11. 通过2:1丙酮-二甲苯3次，每次1-2 min。
12. 纯二甲苯5-10 min。
13. 树胶封片，即可镜检。
二、结果评价
细胞核染蓝紫色，细胞质桃红色。组织细胞排列紧密，凋亡细胞与正常细胞分离，胞核皱缩，但因与组织分离，凋亡细胞略显大。
注意事项
1. 整个操作动作要尽量轻柔，勿用力吹打细胞。
2. 操作时注意避光，反应完毕后尽快在一小时内检测。
常见问题
肿瘤细胞一般体积大，是正常细胞的3倍以上，核大，核畸形怪状，染色深,和分裂相多见，而且多见病理性核分裂相.肿瘤细胞排列松散，容易脱落。肿瘤细胞核浆比例失调，细胞浆染色改变，或者出现空泡，癌细胞背景则是多有坏死。光学显微镜是利用光学原理，把人眼所不能分辨的微小物体放大成像，以供人们提取微细结构信息的光学仪器。通过光学显微镜检测肿瘤细胞形态有两种方法：HE 染色法和瑞氏和杰姆萨混染法。
来源：丁香实验
