确定特定基因的方法--功能克隆
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功能克隆是对人类第一个基因克隆的策略。事实上不可能等到人类基因组DNA 全部序列都测出之后,再去逐一了解每个基因的结构和功能。
在实际研究中,人们认识了-q- 基因,知道了它的功能之后,才去分离并测定其结构。进行这一工作的步骤是:
①根据已知的生化缺陷特征确认与该功能有关的蛋白。
②分离纯化这一蛋白并测定出部分氨基酸顺序。
③根据遗传密码推测其可能的mRNA 序列。
④设计相应的核苷酸探针,杂交筛选cDNA 或基因组DNA 文库,最终获得整个编码区乃至全基因序列。