用异硫氰酸胍和有机溶剂提取ＲＮＡ

收集细胞，离心5000r/min ，5分钟，弃上清，加入异硫氰酸胍变性液（异硫氰酸胍4mol/L；柠檬酸钠25mmol/L，Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L）500m l，混匀，振荡10秒，加2 mol/L醋酸钠50 m l，水饱和酚500 m l和氯仿/异戊醇（49：1）100 m l颠倒混合数秒钟，冰浴15分钟，4℃离心10,000 r/min，15分钟，吸取上清，加入等体积异丙醇或2倍体积无水乙醇，4℃离心10,000 r/min，10分钟，弃上清，70%酒精洗涤一次，抽干，加35 m lDEPC处理水溶解，取5 m l经稀释后紫外测定RNA提取量，其余30 m l分装，-20℃保存备用。