关于蛋白酶底物

问：蛋白酶底物Glt-ALA-ALA-phe-MCA，加入酶反映完毕后，需要用到excitation wavelength and emission wavelength， 高手能否解释一下，多谢。

答：你需要用两个波长，一个是激发波长，一个是释放波长，激发波长是用来激发酶反应，而释放波长，是反应后的生色产物的释放波长，可以通过测定吸光值得变化测定酶活

问：我用stop method 测活性, 加入SDS变性后, 采用 excitation wavelength and emission wavelength, 所以, excitation wavelength 不是用来激发酶反应

答：激发的是生色产物，你的底物是带有荧光标记的，当生成的产物只有激发波长下才能释放荧光，在释放波长下测定荧光的强弱，而确定反应的程度。