细胞生长检测4：MTS检测法

MTS 检测法

 

1． 培养 IL-2 依赖细胞株 CTLL-2 细胞或 HT-2 细胞（检测 IL-2 ），或者 IL-3 依赖细胞株 FDC-P1 细胞或 FL5.12 细胞（检测 IL-3 ）到对数生长期。

2． 取 96 孔细胞培养板，每孔加 0.1ml 含 1 × 10⁴ ～ 2 × 10⁴ 上述细胞之一的 DMEM 培养液（加 10 ％小牛血清）。

3． 每孔加 0.1ml 系列稀释的待测细胞因子（ IL-2 或 IL-3 ）样品或细胞因子标准品，在 37 ℃ 5 ％ CO₂ 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养 24 小时。

4． 每孔加 20 μ l MTS/PMS 混合液，继续培养 3 ～ 4 小时显色。

5． 检测前摇晃培养板 10 秒钟，混匀颜色。在酶联检测仪上，波长 570nm （或 490nm ，或 570nm 和 690nm ）处检测各孔的光吸收值（ OD ）。用样品稀释度对 OD 值（ OD₅₇₀ 、 OD₄₉₀ 或 OD₅₇₀ /OD₆₉₀ ）绘制剂量 - 反应曲线，根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。