细胞生长检测：MTS检测法

 

1．培养IL-2依赖细胞株CTLL-2细胞或HT-2细胞（检测IL-2），或者IL-3依赖细胞株FDC-P1细胞或FL5.12细胞（检测IL-3）到对数生长期。

2．取96孔 细胞培养 板，每孔加0.1ml含1×10 ⁴ ～2×10 ⁴ 上述细胞之一的DMEM培养液（加10％小牛 血清 ）。

3．每孔加0.1ml系列稀释的待测 细胞因子 （IL-2或IL-3）样品或 细胞因子 标准品，在37℃ 5％ CO ₂ 的饱和水汽二氧化碳培养箱中培养24小时。

4．每孔加20μl MTS/PMS混合液，继续培养3～4小时显色。

5．检测前摇晃培养板10秒钟，混匀颜色。在酶联检测仪上，波长570nm（或490nm，或570nm和690nm）处检测各孔的光吸收值（OD）。用样品稀释度对OD值（OD ₅₇₀ 、OD ₄₉₀ 或OD ₅₇₀ /OD ₆₉₀ ）绘制剂量-反应曲线，根据标准品曲线计算样品中细胞因子的量。