基因cloning经验指南

我们克隆基因的时候，往往可以通过一些途径（如pcr,EST库或者文库筛选）得到基因的部分片段。然后通过3'race 和 5'race 方法往两端延伸。有时会出现无法延伸的状况，如果你超作没有失误的话，这时候很有可能是你模板GC含量过高的缘故，普通pcr 是没有办法延伸的，可以用扩高gc 含量模板的Taq酶和BUffer就可以成功。这是我克隆基因中获得的经验。