提取干血斑中的DNA样本

DNA提取需在II级生物安全柜内完成

1.用打孔器将6mm直径大小的DBS打入1.5ml的离心管中，用烧灼和酒精搽拭的方法消毒打孔器头部。

2.每个离心管中加入1ml去离子水，涡旋10秒，在管壁外侧做离心方向标记；

3.将离心管置于摇床上，转速500-600转/分，室温，摇动15分钟；

4.室温下，离心管12500×g，离心3分钟；

5.小心从离心管中吸去上清约950μl去离子水，留50μl于管中；

6.重复2-5步；

7.每管中加入新鲜配置的10% Chelex100 Resin 150μl（0.1克Resin / 1ml去离子水），涡旋混匀10秒；

8.室温下，离心管12500×g，离心3分钟；

9.水浴箱中56℃，温育2小时；

10.取出离心管轻轻振荡；

11.放入100℃开水中煮沸8分钟；

12. 室温下，离心管12500×g，离心3分钟；

13.立即小心吸取100-120μl上清（应避免吸到Chelex100树脂，其对PCR有抑制作用）于干净的管中；

14.放于-20℃保存。