[建议]发现一个重大问题:两个版本的tricine-sds-page存在很大的差异(差错)??
丁香园论坛
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我看了论坛里的很多关于tricine-sds-page帖子,发现了一个很大的问题:“英文版”和“中文版”在电泳buffer的配制上存在很大的矛盾。
“中文版“ 的阴,阳极buffer的pH分别是 8.25 和8.9
而”英文版"的配方的pH刚好相反。 请问到底哪个版本是对的。
下面是我引用的中文的版本:
1,电极缓冲液要重新配制了。tricine-sds-page与一般的sds-page不同,它含有阴,阳两极缓冲液,在配制的时候pH值要注意了,不要弄错。一般阴极缓冲液为8.25,阳极为8.9。另外电泳的电压不可过高。40~60V即可。
21.正极电泳缓冲液(1x):
12.19gTris 先溶于400ml双蒸水1mol/L的HCL调至PH8.9,再定容至500ml。
2.负极电泳缓冲液(1x):
6.055g Tris ,8.958g Tricine(三羟甲基甘氨酸),5.0g SDS ,将这三种药品溶于400ml双蒸水中,1mol/L的HCL滴定到PH8.45(这步大家注意了,我实际试验操作发现没调PH值前,PH值实际为8.35,因此用的是NaOH,老外的文章也不可信哦),在加水定容到500ml。
以下是英文版本:
1。Anode buffer (0.2 M Tris, pH 8.9)
Dissolve 12.11 g Tris base in 200 ml dH2O. Adjust pH to 8.9 with 1 N HCl. Add dH2O to 500 ml total volume. Filter the solution through a 0.45 µm filter and store at 4°C.
Cathode buffer (0.1 M Tris, 0.1 M tricine, 0.1% SDS, pH 8.25)dissolve 6.055 g Tris base and 8.96 g tricine in a total volume of 500 ml dH2O. Filter the solution through a 0.45 µm filter, add 0.5 g electrophoresis-grade SDS, and store at 4°C. It is not necessary to adjust the pH of this buffer, which should be around 8.25.
“中文版“ 的阴,阳极buffer的pH分别是 8.25 和8.9
而”英文版"的配方的pH刚好相反。 请问到底哪个版本是对的。
下面是我引用的中文的版本:
1,电极缓冲液要重新配制了。tricine-sds-page与一般的sds-page不同,它含有阴,阳两极缓冲液,在配制的时候pH值要注意了,不要弄错。一般阴极缓冲液为8.25,阳极为8.9。另外电泳的电压不可过高。40~60V即可。
21.正极电泳缓冲液(1x):
12.19gTris 先溶于400ml双蒸水1mol/L的HCL调至PH8.9,再定容至500ml。
2.负极电泳缓冲液(1x):
6.055g Tris ,8.958g Tricine(三羟甲基甘氨酸),5.0g SDS ,将这三种药品溶于400ml双蒸水中,1mol/L的HCL滴定到PH8.45(这步大家注意了,我实际试验操作发现没调PH值前,PH值实际为8.35,因此用的是NaOH,老外的文章也不可信哦),在加水定容到500ml。
以下是英文版本:
1。Anode buffer (0.2 M Tris, pH 8.9)
Dissolve 12.11 g Tris base in 200 ml dH2O. Adjust pH to 8.9 with 1 N HCl. Add dH2O to 500 ml total volume. Filter the solution through a 0.45 µm filter and store at 4°C.
Cathode buffer (0.1 M Tris, 0.1 M tricine, 0.1% SDS, pH 8.25)dissolve 6.055 g Tris base and 8.96 g tricine in a total volume of 500 ml dH2O. Filter the solution through a 0.45 µm filter, add 0.5 g electrophoresis-grade SDS, and store at 4°C. It is not necessary to adjust the pH of this buffer, which should be around 8.25.