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基于阻抗的rtca细胞分析技术应用--Transwell侵袭实验

蔼可芯昂生物仪器(上海)有限公司

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Maestro Z基本原理:将细胞样本置于阻抗板中(底部埋入电极的96孔培养板)进行培养,当细胞贴附于电极并伸展开后,将微小的电信号施加于电极上,细胞间形成的联接将阻挡这些电信号的通过,导致阻抗值的读数增加,而细胞结构形态上的细微改变(比如源于受体介导的信号传递或细胞形态学变化)也会影响阻抗值。也就是说,细胞的贴壁、黏附、增殖及形变等过程都会引起阻抗的变化,细胞的增殖数量与阻抗呈现一个正相关的关系。
阻抗检测会计算有多少电信号(上图中青色箭头所示)被电极-细胞的界面所阻挡。当电极未被覆盖时,电信号能轻松穿过,这时阻抗值比较低。当细胞盖住电极时,能够通过的电信号就变少了,相应的阻抗值就会增大。当细胞死亡或者脱离电极时,阻抗值就会恢复到基线水平。

技术优势:
1.灵敏度高
能够检测出成像技术难以捕捉的、微小的细胞形态、构象变化;
2.长时间持续监测
不会错过药物反应时间框,在给药前可通过增殖曲线判断细胞状态;
3.无标记、原位
测量过程完全不会影响细胞生物学特性,无需优化抗体用量、染料浓度;
4.孵育时间等参数
自动采集数据,中间无需手动操作。

实验的一般流程:

基于阻抗检测的细胞分析技术,使得实时、不间断且无需标记的细胞监测成为可能。对数据流的后续分析可以揭示细胞间互作和细胞-药物反应的动力学,可以更好地理解其机理而无需做费时费力的多次终点法实验。
 

应用:利用划痕实验评估MCP抑制肿瘤细胞转移疗效

      改性柑桔果胶(MCP)可以从柑桔的皮及果肉中提取到,是一种人体不易吸收的水溶性多糖复合物,其抗肿瘤转移的疗效正受到越来越多的关注。佐治亚大学的Gomillion博士利用实时定量阻抗(Maestro Z系统)实验去评估MCP抑制两种肿瘤细胞 (MCF-7和HCC1806) 转移疗效的。

      研究者通过比较划痕处理后细胞迁移的趋势和速度,发现Maestro Z系统能够轻松地将两种肿瘤细胞系的差别区分开来。HCC1806细胞相对于MCF-7而言有更强的迁移能力, 这点能够和临床上观察到的三阴乳腺癌肿瘤细胞的高转移能力相呼应。此外,她们还发现MaestroZ系统对于不同抗转移MCP在作用效应和动态上的微小差别很敏感,证实了它在评估抗转移治疗疗效方面的价值。若要了解更多,可参考:(page_2 - (axionbio.cn)

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