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原代细胞染色技术

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一.台盼蓝染色

(1)制备单个细胞悬液,并作适当稀释(106 细胞/ml)。

(2)染色:取9滴细胞悬液移入小试管中,加一滴0.4%台盼蓝溶液,混匀。

(3)计数:在3分钟内,用血球计数板分别计数活细胞和死细胞。

(4)镜下观察,死细胞被染成蓝色,而活细胞拒染。

(5)根据下式求细胞活力:

二.伊红Y染色

(1)制备1×106 -5×106 细胞/ml的细胞悬液。

(2)取0.1ml细胞悬液加0.1ml伊红Y染液混合。

(3)用计数板镜下计数活、死细胞数。

(4)镜下观察,着红色的为死细胞。按公式计算细胞活力。

三.苯胺黑染色实验

(1)制备1×106 -5×106 细胞/ml的细胞悬液。

(2)将1份1%苯胺黑溶液与含血清生理盐水作1:9混合稀释,使其成0.1%苯胺黑染液。

(3)取0.1ml细胞悬液加0.1ml苯胺黑染液混合。室温放置10分钟。

(4)用计数板镜下计数 ,黑色细胞为死细胞,按公式计算活细胞率。
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