一种适于植物幼胚整体原位杂交的方法
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组织原位杂交已广泛应用于植物组织、细胞的基因时空表达研究。
目前主要有3种方法:一是常规组织切片原位杂交,广泛适用于各种组织;二是大量细胞的整体原位杂交,已应用于花粉管和藻类合子;三是微量细胞的整体原位杂交,用于分离胚囊。整体原位杂交具有易操作、周期短、整体效果明显等特点,是一种较新的组织原位杂交方法。
胚胎是个体发育的最初阶段,整体原位杂交作为检测胚胎发育过程中基因表达整体效果的快速、有效手段,已在果蝇等少数几种动物中应用,但在植物胚胎发育方面迄今未见报道。
我们以本实验室从烟草心形胚cDNA文库中分离出的THE3克隆作为探针,进行了烟草球形胚和心形胚的mRNA整体原位杂交,初步证明该cDNA在心形胚中优势表达。