组织培养繁殖(propagation by tissue culture)

在人工培养基中，使离体组织细胞培养成为完整植株的繁殖方法。果树的组织培养材料是植株离体材料，称外植体。用顶端分生组织及其下的第1-2个叶原基切离培养的，称茎尖培养；以小段成熟枝条进行培养的称茎段培养；以叶片或叶鞘组织进行培养的，称叶片培养。

利用组织培养方法繁殖果树植株具有占地面积小，繁殖周期短，全年都能进行繁殖，繁殖系数高等特点。还可以消除果树的某些病毒病，适应果树向品种更新快、矮化密植以及无病毒栽培方向发展的需要。

果树组织培养繁殖的研究，始于20世纪40年代。中国起步较晚，但发展较快。已在苹果、葡萄、柑橘、草莓、猕猴桃、菠萝、枇杷等树种上开展了组培脱毒和苗木繁殖工作，建立了苹果、葡萄、草莓、猕猴桃等果树的组培苗木果园。

培养基是外植体赖以生长和发育的基质。常用的培养基有含盐种类较少，盐量较低的White、Nitsch、Knop培养基；也有含盐种类较多，盐量较高的B5、B6、H Ls及M等培养基。MS培养基的主要成分包括N、P、K、Ca、Mg等大量元素和Mn、Zn、Cu、Co、B、I、Mo、Fe等微量元素、蔗糖及氨基酸、B族维生素、烟酸、肌醇等有机成分。培养基中加用6-8%的琼脂做凝固剂。还须加入一些附加成分，如水解酪蛋白、植物激素。常用的植物激素有细胞分裂素，如激动素(KT)、六苄基腺嘌呤(BA)、玉米素(Zi)等；以及生长素，如吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)及2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)等；

常用的接种材料有茎尖、茎段、叶片等，一年四季都可取摘、接种，各季节的材料都能分化、出苗。材料的大小，因培养目的而不同，为脱除繁殖材料的病毒，就原子能0.1-0.2mm的茎尖；对一般繁殖材料，可取大茎尖或茎段培养，以提高分化率和分化速度。一般要经过以下两个灭菌过程，先用湿润剂处理使杀菌剂能很好渗入培养材料，湿润剂有70-75%酒精等，酒精兼有杀菌能力；再选择灭菌快而彻底，容易从材料上去除，并对接种材料毒害作用小的药剂。

接种后的繁殖材料要求置于25-30℃恒温和1500-3000勒克斯(lx)光照强度，每日光照16小时的条件下培养，苗的分化速度较快，分化苗的生长正常而迅速。

生根培养：采用1/2Ms、1/2B5、White、Knop等含盐量低的培养基。将培养基所用的盐类和生长素配成营养液，把够标准的绿苗基部浸于营养液中培养生根。生根培养的温度与扩大繁殖期间基本相同。而光照强度一般要求在2000勒克斯(lx)以上。