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组织培养 tissue culture

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组织培养 tissue culture 从多细胞生物的个体无菌地取出组织块、细胞群,在适当的条件下使之继续生活的技术。其中有将取出的组织移植培养在其他生物体的某一部位的体内培养( culture in vivo)和培养在玻璃器内的试管培养( culture in vitro)。前一种培养,培养的组织块尽量置于不受其生物体内特异性影响的环境里,而一般所说的组织培养系多指后者。试管组织培养最初搞成功的,是哈利荪( R G Harrison)氏( 1907),将蛙的大块神经组织放在蛙的淋巴液培养基中进行的。现在不仅广泛用于细胞的繁殖、分化、癌的研究,而且还利用组织培养细胞进行药物效果的研究,也不断被利用于制造疫苗。另外,因为通过组织培养能获得大量的单一的细胞群,所以用作生物化学的研究材料非常方便。因此,目前在整个生物科学领域,这种技术几乎已成为不可缺少的了。组织培养有几种方式。细胞培养是经胰蛋白酶等处理使组织块解离而获得的细胞(细胞解离)。一般,细胞是在培养基上作为单层的薄片而扩散(单层培养)。最极端的方式是从单一细胞着手的纯株培养。狭义的组织培养是使用小组织块,悬滴培养是其中之一。器官培养是使用相当大的组织、器官块,并不使之单层扩散,而是使之保持在三维结构的状态下进行培养;培养器一般为玻璃制或塑料制。培养可根据研究所需要的细胞数,或为了便于光学观察而选择各种形状、各种大小的材料。以前曾使用凝固血浆为培养基,但现在主要使用培养液。这种培养液除含有无机盐外,还加入多种维生素类和氨基酸,制成各种合成培养基,根据研究的目的进行选择使用。但这只限于能在这种合成培养基上繁殖的细胞。通常动物细胞的培养,要添加血清。植物细胞则添加椰子米乳液和酵母抽出液,或植物激素等以促其生长。培养用的材料应保持最适温度。对动物细胞,调节其气体的环境也很重要,一般是将培养器保持在 5 CO2 95%空气组成的气态中。从包括人在内的各种动物组织中,通过培养可得到一些半持久的、规则的继续繁殖的细胞株。过去曾认为,经组织培养的细胞,除了器官培养外,比机体内的组织细胞性质变得更单纯,而且不能维持分化特征,但现在认为这并不是一般的规律。在植物细胞方面,由小块组织中取到的一个细胞使之繁殖而成为一个完整的植物体已获得成功。在动物方面,在试管内进行细胞杂交,通过培养,而人工的得到具有新性质的细胞的尝试,正在获得成功。

 

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