植物细胞死活鉴定
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(1) 原理
活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显,活细胞的原生质具有分别透性;而死细胞则为通透性。分别透性是质壁分离的先决条件,因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的则说明是死的。
(2) 仪器药品及材料
洋葱及其它植物 材料、酒精灯、显微镜、小刀、镊子、玻璃片、1M蔗糖
(3) 实验步骤
撕洋葱表皮细胞滴加1M蔗糖中,在显微镜下观察,细胞很快发生质壁分离的,这就是活细胞活着的证据。另把拨取的同样制片,用冷冻,加热,干燥,酒精浸蘸等办法将它们的细胞杀死,然后取代上述活材料,做质壁分离实验,结果看到已死的细胞,不能发生质壁分离现象。
用尿素、KNO3、CaCl2等来代替蔗糖,能快速鉴定细胞死活。
2、 活体染色法鉴定细胞死活
(1)原理
死活细胞间不但透性不同,而且PH等情况也不同,他们对某些染料的反映明显不同,某些染料能在活细胞的细胞液中积累而不染活原生质,但能使死细胞的原生质染色而无积累于液泡的现象,所以可根据某些染料活体染色的情况来鉴定细胞死活。
(2)仪器、药品及材料
显微镜、镊子、载玻片、刀片、0.01%中性水溶液、1M蔗糖溶液、小麦、洋葱、水稻、白菜、棉花或其它植物。
(3)实验步骤
(4)取洋葱或其它材料,用镊子撕下表皮(如表皮不易撕下,也可在水中用锋利的刀片轻轻刮去多余分部分),或用刀片作切片若干,将表皮或切片浸入中性溶液5-10分钟,取出用清水浸洗后置于载玻片水滴内,加盖玻片,在显微镜下观察。
活细胞一般在液泡内染成红色至紫色,原生质不染色,死细胞常成橙红色,原生质和细胞核 染色。撕破的细胞,只剩细胞壁时,呈淡红色或淡紫色。
为了进一步鉴别死活,可把玻片上的水溶液吸去,滴一滴1M蔗糖溶液,便可观察到活细胞能发生质壁分离,死细胞及空细胞都没有这种现象。
可用加热,冷冻或其它办法杀死植物组织,然后用上面所述方法进行处理,比较与活组织有何不同。
记录结果,并加以解释。