植物细胞死活鉴定

1、 用质壁分离法鉴定细胞死活

（1） 原理

活细胞与死细胞在性质上有许多差别，特别是透性的变化最为明显，活细胞的原生质具有分别透性；而死细胞则为通透性。分别透性是质壁分离的先决条件，因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的，不能发生质壁分离的则说明是死的。

（2） 仪器药品及材料

洋葱及其它植物材料、酒精灯、显微镜、小刀、镊子、玻璃片、1M蔗糖

（3） 实验步骤

撕洋葱表皮细胞滴加1M蔗糖中，在显微镜下观察，细胞很快发生质壁分离的，这就是活细胞活着的证据。另把拨取的同样制片，用冷冻，加热，干燥，酒精浸蘸等办法将它们的细胞杀死，然后取代上述活材料，做质壁分离实验，结果看到已死的细胞，不能发生质壁分离现象。

用尿素、KNO3、CaCl2等来代替蔗糖，能快速鉴定细胞死活。

2、 活体染色法鉴定细胞死活

（1）原理

死活细胞间不但透性不同，而且PH等情况也不同，他们对某些染料的反映明显不同，某些染料能在活细胞的细胞液中积累而不染活原生质，但能使死细胞的原生质染色而无积累于液泡的现象，所以可根据某些染料活体染色的情况来鉴定细胞死活。

（2）仪器、药品及材料

显微镜、镊子、载玻片、刀片、0.01％中性水溶液、1M蔗糖溶液、小麦、洋葱、水稻、白菜、棉花或其它植物。

（3）实验步骤

（4）取洋葱或其它材料，用镊子撕下表皮（如表皮不易撕下，也可在水中用锋利的刀片轻轻刮去多余分部分），或用刀片作切片若干，将表皮或切片浸入中性溶液5－10分钟，取出用清水浸洗后置于载玻片水滴内，加盖玻片，在显微镜下观察。

活细胞一般在液泡内染成红色至紫色，原生质不染色，死细胞常成橙红色，原生质和细胞核染色。撕破的细胞，只剩细胞壁时，呈淡红色或淡紫色。

为了进一步鉴别死活，可把玻片上的水溶液吸去，滴一滴1M蔗糖溶液，便可观察到活细胞能发生质壁分离，死细胞及空细胞都没有这种现象。

可用加热，冷冻或其它办法杀死植物组织，然后用上面所述方法进行处理，比较与活组织有何不同。

记录结果，并加以解释。