琼脂糖凝胶电泳实验

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【实验目的】
学习水平式琼脂 糖凝胶电泳检测DNA 的方法和技术。
【实验原理】
琼脂糖凝胶电泳技术是DNA 分子片段的分子量测定 和分子构象研究以及DNA 分离纯化的重要实验手段。DNA 分子在琼脂糖凝胶电泳中泳动时受到电场驱动力和凝胶的摩擦阻力。一般情况下，单位长度双链DNA 带有几乎相等的电荷，故在一定电场强度下，DNA 分子的迁移速度取决于凝胶的摩擦阻力，即DNA 分子本身的大小和构型。DNA 分子的迁移速度与相对分子量的对数值成反比关系，具有不同长度的DNA 片段由于其泳动速度不同而得到分离。具有相同一级结构但构型不同的DNA 分子也可以通过这种方法进行分离。
溴化乙锭(EB)是一种荧光染料，在紫外光照射下可发出波长590nm 的红色荧光，DNA 分子 与EB 形成荧光络合物后，其发射的荧光比原来要增强数十倍，常用来观察凝胶中DNA 条带的位置。
【仪器、材料与试剂】
1.琼脂糖凝胶(0.7～1.5%，琼脂糖粉末与1×TAE 配成)，TAE(Tris-乙酸盐，EDTA)电泳缓冲液