染色体结构显示与检测

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1）染色体 显带
显Q带法
1. 漂洗：取经过干热预处理或已老化的染色体标本，置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。
2. 染色：浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。
3. 漂洗：浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次，每次5分钟。
4. 观察：向标本染色体面滴1~2滴新鲜缓冲液，覆以盖片（避免出气泡），置荧光显微镜 下观察。

显G带法
胰酶-Giemsa混合显带法
1．预处理：取中期染色体标本，置60℃～60℃温箱中20～30分钟，或在37℃温箱过夜，然后浸入0.025M磷酸缓冲液 中，pH6.8，56℃温浴10分钟。
2．消化和染色：用现配制的胰蛋白酶-Giemsa混合液消化和染色10～30分钟，混合液按如下比例配制：
0.025 M 磷酸缓冲液pH6.8 73.0 ml
甲醇 27.0 ml
Giemsa干粉 50.0 mg
0.25%胰酶 0.3～0.4 ml
3．封片：染色后用自来水冲洗，入蒸馏水漂洗数次、晾干、二甲苯透明2~3分钟，封入中性树脂中。

Giemsa显带法
1．预处理：将标本置入60~80℃温箱或烤箱中20~30分钟，亦可在37℃温箱过夜。
2．胰酶消化：用0.85%的NaCl配制0.25%胰蛋白酶溶液消化3~5分钟。
3．染色：取出标本片，先直立于吸水纸上除去多余胰酶液后，随即置入Giemsa染液中，染10分钟。
4．封片：自来水洗，蒸馏水漂洗，晾干，二甲苯透明2~3分钟，封入中性树胶中。

2）姐妹染色单体分化染色
BUdR掺入和制片程序
1．BUdR培养液制备：先制备好含BUdR的培养液（最终浓度为3~10微克/毫升）。
2．BUdR掺入：如用传代细胞，在末次传代后，改换用含BUdR的培养液培养。如为人末梢血细胞，一开始就用含BUdR培养液培养（培养瓶放在特制黑色木盒、黑布中或黑纸包裹）37℃温箱内培养。
3．中止掺入与制片：待细胞经历两个细胞周期（人周围血细胞培养48或72小时）