有丝分裂中期染色体观察
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学习染色体 压片的方法,观察有丝分裂各时期的细胞及中期染色体的形态结构。
二.实验原理:
各种生长旺盛的植物 组织,常进行着细胞分裂。经过适当的取材处理,加以固定、离析、染色、压片方法,可以迅速地将细胞分散附着在载片和盖片之间,进行有丝分裂和染色体动态观察,是遗传学研究的一种基本方法。
三.实验材料、用具及试剂
实验材料:洋葱根尖
用具:显微镜、解剖器材、载玻片、盖玻片、酒精灯等。
试剂:无水乙醇、70%乙醇、冰醋酸、秋水仙素、改良的苯酚品红、解离液(浓盐酸:95%乙醇 1:1)
四.实验步骤:
1.预处理:将洋葱的鳞基置于盛水的小烧杯上,放在25℃温箱中,待根长到2cm时,在上午九时摘下根尖,放到0.02%秋水仙素溶液中,浸泡处理3-4小时。(浸泡在蒸馏水中4度 24小时)
2.固定:经过前处理的根尖,再放到卡诺固定液中,固定24小时。固定材料可转入70%乙醇中,在4℃冰箱中保存。
3.解离:从固定液中取出根尖,用蒸馏水漂洗,再放到解离液中,室温水解10min。
4.染色压片:将经过解离的根尖用蒸馏水漂洗数次,放在新培养皿里。然后将根尖放到载玻片上,切取根尖分生组织,加1-2滴改良的苯酚品红,静置10min。盖上盖玻片,用吸水纸吸取多余的染料,在酒精灯上缓慢往复3-4次,注意不要沸腾。在载片与盖片之间放一刀片,用解剖针柄轻敲盖片的四角,再用拇指适当用力下压,使材料分散成薄薄的一层。在显微镜下镜检。