植物细胞微丝骨架的活体观察

从广义上来讲，细胞骨架是一种细胞器，包含微管、微丝和中间纤维 3 种不同的成分。迄今为止，在植物细胞中仅发现了微管和微丝这两种细胞骨架。它们在细胞内高度动态，参与着许多重要的生理过程：细胞形态建成、细胞分裂、胞质运输、细胞器的运动等。细胞内的骨架结合蛋白参与着细胞骨架的动态调控。

器材：

转入 GFP-Lifeact 基因的拟南芥。

器具：

① 荧光显微镜

② 镊子

③ 载玻片

④ 盖玻片

试剂：

① PBS 溶液

② NaCl 溶液（0.5 mol/L）

植物细胞微丝骨架的活体观察的基本过程可分为如下几步：

（一）观察植物细胞内的微丝骨架阵列

为了适应功能的需要，不同类型的植物细胞形成了其特有的形态。取转入 GFP-Lifeact 基因的拟南芥幼根及幼叶，制作临时装片，于显微镜明场下仔细观察

幼叶上的表皮细胞和幼根成熟区上的根毛细胞的形态。然后转至荧光下（激发波长 488 nm）观察这两种类型的细胞内微丝骨架的排列方式。

1. 幼根伸长区根毛细胞

细胞形状呈长管状，在大多数的根毛细胞内微丝骨架的排列大致与根毛的生长方向平行。

2. 幼叶的叶表皮细胞

成熟的双子叶植物叶表皮细胞大多排列紧密，呈不规则的多边形。幼叶的表皮细胞还在生长发育中，其内的微丝骨架在细胞的某些部位密集，在该部位的进一步伸展中发挥作用。

（二）观察盐溶液处理后植物细胞内微丝骨架阵列的变化

植物细胞内的微丝骨架是高度动态的，根据植物细胞本身的生长状态，以及外界环境信号刺激的不同，微丝骨架的排列会发生显著的变化。

重新取拟南芥幼根及幼叶，制作临时装片，于荧光显微镜下（激发波长 488 nm）观察叶表皮细胞和根毛细胞内微丝骨架的排列方式，并分别绘出大多数叶表皮细胞和根毛细胞内的微丝骨架阵列。然后取下该装片，在盖玻片的一端滴加 NaCl 溶液（0.5 mol/L），将吸水纸放在盖玻片另一端，轻轻地使 NaCl 溶液浸润标本，静置 2 min 后于荧光显微镜下观察细胞内微丝骨架的阵列是否发生变化。