对付支原体污染的一点经验
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前阵子做单抗,做了几次细胞融合都没做出来,后面怀疑是SP2/0受支原体污染,细胞生长速度减慢,出现细胞碎片,换液后情况稍好。怀疑受污染后我对细胞做了一系列的处理,终于有一种处理成功地削除了支原体污染,细胞融合也成功了,现在单抗已经做出来。现在想把我的处理方法贴出来,希望对一些遇到同样问题的朋友有用。
处理方法:
以两种抗生素交替使用,第一种是2-3倍于正常浓度的双抗(青霉素、链霉素),第二种是10ug/ml的盐酸四环素。每天都换液,两种抗生素交替使用,开始四天,每天换液两次,持续一到两周,直到细胞生长良好。
两点声明:
1、SP2/0比较好养,其它细胞在这么高的抗生素浓度下生长有没影响本人没做过试验。
2、由于没做过鉴定,我的细胞是否百分百是支原体污染我也不敢确定,但从状态看和别人描述的很一致。个人觉得细胞融合对SP2/0生长状态要求很高,如果你的细胞融合总是不成功,那么应该首先考虑一下SP2/0的问题,我当时就摸了很多条件,浪费了两三个月的时间。