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生物制药产业化及膜分离技术,下游纯化解决方

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swordhearter wrote:
最近做增强完整性测试,有时候泡点合格但是扩散流不合格,有时候是扩散流流合格,但是泡点又不合格.不知道这两种情况是什么原因造成的,该如何解决呢?谢谢先!!!


要看您的测试对象是什么。
对于大面积的滤芯,用扩散流(Forward flow)更准确。
而对于小面积的Disc膜片,用泡点法(Bulb point)更可取。


888老师,我用的是10'' PVDF滤芯, 采用完整性测试仪,有时候泡点合格但是扩散流不合格,有时候是扩散流流合格,但是泡点又不合格.不知道这两种情况是什么原因造成的,该如何解决呢?


yangzhiming wrote:
888wym 老师:
你好!我想请教你几个问题,
1.我们用盐酸胍溶解包涵体,想去除盐酸胍,现在我们使用的是透析的 方法,可是放大到生产是不可取的,还有别的方法可用吗,比如说中空纤维超滤或膜过滤等,具体怎么操作.
2.HPLC纯化后的样品中含有乙腈,我们使用旋转蒸发去除,用膜过滤的方法是否更好?
请给于指导.谢谢你

很高兴收到您的问题。
1,用膜去除盐酸胍,不论是量,还是时间,都要优越很多。你就尽快解决吧。
2,同样,除去不多的乙腈,该方法同样适用。但是需要注意切割分子量的选择
.


盐酸胍溶解包含体后,直接采用超滤(膜或中空纤维),如果盐酸胍浓度变化剧烈,则重组蛋白不能复性或者复性率极低,并且会很快出现大量沉淀影响超滤过程甚至危害设备,需要注意。盐酸胍浓度降低的过程,实际上就是蛋白复性的过程,以缓慢温和为宜,所以一般采用透析或缓慢稀释的工艺。不知道yangzhiming站友操作的规模有多大,我们做过20升盐酸胍蛋白变性溶液对200升复性溶液的透析复性。有些蛋白复性,在缓慢稀释的过程中沉淀产生得不多,可以稀释复性后再超滤除盐。

hcy_sypu wrote:
888wym 老师您好!
关注您的帖子很久了,有个问题想请教您。
我们在做一个毕赤酵母分泌表达的重组蛋白,分子量在6000Da,高密度发酵得到的,发酵液40%左右是菌体,在上柱前以前是用离心的方法来澄清,效率很低,而且上清液并不很澄清。如果要产业化是否最好用TFF来澄清呢?板框过滤是否对菌丝体效果好而对类似酵母的菌体不适用呢?

我看您介绍的陶瓷膜切向流过滤技术,是否原理也象超滤膜包那样,也存在截留分子量及是否存在非特异性吸附的问题?象我这种情况,要保证滤出液澄清,又要保证6KDa目的蛋白的收率,在选择陶瓷膜时,要不要考虑膜孔径问题?

您的这个属于很麻烦的一个操作,我载工作中遇到不是头一回。
好的设备价格离谱,差的设备不能解决问题。就这么简单。
用TFF应该是不错的选择。具体袄什么产品,及多大的分子量,需要考虑


hcy_sypu站友,不知道你的发酵规模有多大(重组蛋白发酵规模不会很大吧)?规模许可,其实离心的办法完全可以在现有设备下解决问题,提高离心转速延长离心时间即可;规模大,可以连续流离心。其实酵母菌是容易离心下来而且会压缩得很紧密。你碰到的情况可能的原因有,离心转速时间不够,培养基中盐(硫铵)浓度较高。离心得到的上清夜,如果还不是很澄清不能满足下个工序的要求,再常规超滤处理,不过你蛋白的分子量太小,得慎重。

向楼主致敬!


swordhearter wrote:
888老师,我用的是10'' PVDF滤芯, 采用完整性测试仪,有时候泡点合格但是扩散流不合格,有时候是扩散流流合格,但是泡点又不合格.不知道这两种情况是什么原因造成的,该如何解决呢?


严格操作规范.再试试/
用扩散流方法.
泡点不准确.
润湿要彻底,溶剂要规范.如果用有机溶剂和水的混合液,比例要求准确.
测试温度要注意.22+/-5


XD_laurel wrote:
yangzhiming wrote:
888wym 老师:
你好!我想请教你几个问题,
1.我们用盐酸胍溶解包涵体,想去除盐酸胍,现在我们使用的是透析的 方法,可是放大到生产是不可取的,还有别的方法可用吗,比如说中空纤维超滤或膜过滤等,具体怎么操作.
2.HPLC纯化后的样品中含有乙腈,我们使用旋转蒸发去除,用膜过滤的方法是否更好?
请给于指导.谢谢你

很高兴收到您的问题。
1,用膜去除盐酸胍,不论是量,还是时间,都要优越很多。你就尽快解决吧。
2,同样,除去不多的乙腈,该方法同样适用。但是需要注意切割分子量的选择
.


盐酸胍溶解包含体后,直接采用超滤(膜或中空纤维),如果盐酸胍浓度变化剧烈,则重组蛋白不能复性或者复性率极低,并且会很快出现大量沉淀影响超滤过程甚至危害设备,需要注意。盐酸胍浓度降低的过程,实际上就是蛋白复性的过程,以缓慢温和为宜,所以一般采用透析或缓慢稀释的工艺。不知道yangzhiming站友操作的规模有多大,我们做过20升盐酸胍蛋白变性溶液对200升复性溶液的透析复性。有些蛋白复性,在缓慢稀释的过程中沉淀产生得不多,可以稀释复性后再超滤除盐。
您说的很好.值得探讨.
我的建议是,如果是生产的话,透析的步骤还是免的好。切向流的方式可以做的很快,也就是浓度变化剧烈,当然更可以做得很慢。调节TFF压力和膜面积,完全可以达到优化的目的。但是增加一个透析工艺,生产上会增加很多麻烦和成本。
您说是吗?

hcy_sypu wrote:
888wym 老师您好!
关注您的帖子很久了,有个问题想请教您。
我们在做一个毕赤酵母分泌表达的重组蛋白,分子量在6000Da,高密度发酵得到的,发酵液40%左右是菌体,在上柱前以前是用离心的方法来澄清,效率很低,而且上清液并不很澄清。如果要产业化是否最好用TFF来澄清呢?板框过滤是否对菌丝体效果好而对类似酵母的菌体不适用呢?

我看您介绍的陶瓷膜切向流过滤技术,是否原理也象超滤膜包那样,也存在截留分子量及是否存在非特异性吸附的问题?象我这种情况,要保证滤出液澄清,又要保证6KDa目的蛋白的收率,在选择陶瓷膜时,要不要考虑膜孔径问题?

您的这个属于很麻烦的一个操作,我载工作中遇到不是头一回。
好的设备价格离谱,差的设备不能解决问题。就这么简单。
用TFF应该是不错的选择。具体袄什么产品,及多大的分子量,需要考虑


hcy_sypu站友,不知道你的发酵规模有多大(重组蛋白发酵规模不会很大吧)?规模许可,其实离心的办法完全可以在现有设备下解决问题,提高离心转速延长离心时间即可;规模大,可以连续流离心。其实酵母菌是容易离心下来而且会压缩得很紧密。你碰到的情况可能的原因有,离心转速时间不够,培养基中盐(硫铵)浓度较高。离心得到的上清夜,如果还不是很澄清不能满足下个工序的要求,再常规超滤处理,不过你蛋白的分子量太小,得慎重。

向楼主致敬!


您说的有一定的道理。
离心适合小规模的产品。大量的产品,离心是有问题的,即便连续流也是问题。还有问题的关键是固形物含量太多。所以离心有问题。
实际工作中,遇到不少这样的例子。也请有经验的老师给予好的方式或者提醒。


XD_laurel and 前辈:
多谢指教,我们产品现在是中试水平, 现在做的准备是为了以后上生产.
888wym
"切向流的方式可以做的很快,也就是浓度变化剧烈,当然更可以做得很慢。"
我们的产品在盐酸胍不存在时程沉淀状态,所以还没有想到别的溶剂更换.可能会堵塞膜.
XD_laurel
"我们做过20升盐酸胍蛋白变性溶液对200升复性溶液的透析复性。有些蛋白复性".不知道您是怎么实现的,可否赐教.我们现在用的是透析膜.每次的量是500ml对10L的透析液.如果象你说的每次200L的复性液不是很浪费水嘛.有办法再利用吗?


888wym wrote:
您说的有一定的道理。
离心适合小规模的产品。大量的产品,离心是有问题的,即便连续流也是问题。还有问题的关键是固形物含量太多。所以离心有问题。
实际工作中,遇到不少这样的例子。也请有经验的老师给予好的方式或者提醒。


楼主好!收到您回复的PM,很高兴在这个网站能够结识您这样博学热情的老乡!以后去北京出差希望能当面讨教。
这里说的“规模”,我是针对hcy_sypu站友所说的“基因工程重组蛋白”生产。我了解到国内生物制药行业中基因工程这一领域中,产业化操作的规模都不是很大。我们原先750L的发酵罐,是采用的连续流收集菌体。专业背景和阅历的限制,至于生物制药行业中的其它领域,我了解不多。

 

yangzhiming wrote:
XD_laurel and 前辈:
多谢指教,我们产品现在是中试水平, 现在做的准备是为了以后上生产.
888wym
"切向流的方式可以做的很快,也就是浓度变化剧烈,当然更可以做得很慢。"
我们的产品在盐酸胍不存在时程沉淀状态,所以还没有想到别的溶剂更换.可能会堵塞膜.
XD_laurel
"我们做过20升盐酸胍蛋白变性溶液对200升复性溶液的透析复性。有些蛋白复性".不知道您是怎么实现的,可否赐教.我们现在用的是透析膜.每次的量是500ml对10L的透析液.如果象你说的每次200L的复性液不是很浪费水嘛.有办法再利用吗?


重组蛋白的下游工艺,主要是复性和纯化。
重组蛋白的复性,大多会产生沉淀,沉淀产生量和速度,与复性的工艺有关。即使采用透析的方法,变性剂浓度变化(下降)缓慢,仍然会有沉淀产生。为保护设备和提高工艺的稳定性及重现性,最好是复性步骤解决问题,排除沉淀对纯化的干扰。举例:用尿素变性,稀释复性,复性液中保留1~2M脲,有些蛋白并不发生沉淀,此时也可以直接上柱,但是更换无脲的溶液洗涤洗脱,则有沉淀淀积在层析胶中,对胶有伤害而且洗涤洗脱条件批次间难以稳定。再,多数蛋白复性大多对温度有所要求,尽可能保持低温操作。
如果要尽量控制复性操作规模,可以摸索尝试提高复性蛋白浓度。教科书上都是说最佳复性浓度为每毫升100微克左右,但不同蛋白间差别很大,我们就做过一种蛋白在每毫升5-8毫克的浓度下成功复性。
至于“20升盐酸胍蛋白变性溶液对200升复性溶液的透析复性”,就是把20升变性液装在透析袋中在200升复性液中透析,没有什么操作诀窍,多剪些袋子,弄两个大桶,不过这在一般的研究用实验室确实可能有点施展不开,我们是在车间的冷室进行的,搅拌用上置式。至于浪费水或溶剂,有时候是没有办法的事情。
产业化工艺的设计,工艺成本、工艺稳定性、因地制宜的可操作性,都要考虑。


向888wym 及各位楼主致意
也很感谢DXY 给了我们这些后辈一个很好的交流和学习的机会
以后我也要做纯化工艺方面的
还希望大家不吝赐教!!


888老师及各位战友大家好!我们实验室准备购置一套用于实验分析和小量制备的膜分离装置,用来分离发酵液中蛋白,现在对这方面的信息不是很了解,想请教大家,像这样的装置一般多少money?如果有这方面的资料或者是书籍,希望各位大虾不吝赐教,我这里先拜过了!


我可以给你点资料!已经PM你了!!


XD_laurel 您好!
我们要生产的规模是3吨罐,发酵液下来有2.1吨,高密度发酵50%是菌体.在中试时是100L罐,采用的是设备是连续离心,不断补加发酵液,清液流出收集,待菌体沉淀一定量时手工挖去菌体,放大后由于菌浓过高,处理效率过低,此外上清液不够澄清.佩服XD_laurel 的见解,888老师说得很有道理.
现在用的厦门一家的陶瓷膜,0.8微米,澄清效果很好,目的蛋白透过率还可以,但就是料液稀释量过大,目前也没有好的解决办法,希望和大家多多交流学习.

我还有一个难缠的问题,还请各位指教,我就把在微生物版板发的贴贴过来了:

各位专家:
我们公司在做一个酵母表达的蛋白品种,准备中试生产,在中间设备选型上碰到些问题,请专家们指教.酵母分泌表达的蛋白(6000Da)经柱层析纯化后,调pH至等点电沉淀目的蛋白后,实验过程中用小型高速离心机离心去除上清后得沉淀,但放大后,处理液体量过大,公司工程部的意见是选用带滤袋的低速离心机来富集沉淀,但在滤布选择上,我们试过小至5微米孔径的(厂家说的)对沉淀也几乎没有截留效果,这样看来,是不是这种方案行不通.也不知蛋白沉淀类产品生产中是如何富集,还请专家指点.


junlin  wrote:
有位国外专家跟我谈起,他们是用卧式离心机进行固液分离。

多谢junlin帮助,我查了一下,卧式离心机也是需要有滤袋进行截留的,我这个蛋白沉淀没有合适的滤布可以截留.如果选择连续离心的话,成本就太高,还有就是我的样品液体量较大,而沉淀固体量相对较小.
领导的意思是想用过滤的方法来收集沉淀,G4的砂芯滤器又太易堵,中速滤纸及滤膜可以截留住沉淀,但处理速度上可能过慢,我又不清楚在工业生产都是采用什么样的方法来富集蛋白沉淀.
如传统生化方法提取的猪胰岛素,提到过多次锌盐沉淀,再过滤或是抽滤,我很想知道这在工业生产上是如何来实现的.还请各位专家指点.车间建设中,急啊!


首先向所有的朋友致歉。
忙于个人家庭事务,加上从公司辞职,有太多的事情需要处理。所以最近一段来得不多,所有得帖子没有很好的回复,请谅解!

我会尽量花些时间来继续和大家一起分享。
感谢所有托起这个帖子的朋友 !
也是因为这个原因,有的朋友的事情都给耽误了,一并在这里道歉!


alibort wrote:
向888wym 及各位楼主致意
也很感谢DXY 给了我们这些后辈一个很好的交流和学习的机会
以后我也要做纯化工艺方面的
还希望大家不吝赐教!!



欢迎!
希望你也不吝智慧,和大家分享。


helig wrote:
888老师及各位战友大家好!我们实验室准备购置一套用于实验分析和小量制备的膜分离装置,用来分离发酵液中蛋白,现在对这方面的信息不是很了解,想请教大家,像这样的装置一般多少money?如果有这方面的资料或者是书籍,希望各位大虾不吝赐教,我这里先拜过了!


多少银子,不好一概而论。要看您的配置。
泵:从1000~10000不等;
Hold+管道+连接件+压力表:从5000~50000不等。不过我不建议您用太便宜的。一定要卫生级;
还要膜,很重要的。大约5000元
还有硅胶管。大约几百块。


请教:
我正做一色素,从植物中提取得到的,属花色苷类,单体分子量大约只有几百,但都以聚合体存在。对提取液,我试验用膜来初步纯化,结果是:0.02微米的陶瓷膜完全通过,而5000d的有机膜完全截留,有几点想法,不知是否可行,请提供帮助:
1、采用孔径小于0.02微米,而大于5000d的膜,截留除去更多的杂质,而让色素完全通过,是否可行?(由于我手头没有在这之间的膜,没有试验)
2、通常,一种植物的茎叶部分,分子大小在0.02微米与5000d之间,是否有很多的杂质(花色苷以外的成分),换名话说:草本植物的茎叶部分,在0.02微米与5000d之间,是否有更多的成分分布?


您的试验,我需要确证一下几个问题
1,聚合体分子量到底多大 ?
2,您用的膜,虽然标示5KD和0.02um,实际情况怎么样 ?您需要用标准品去作标准曲线 ,确认分子量的可信度。
3,据我所知,0。02um的陶瓷膜,基本上不准确。
4,您的 色素成分,在膜上有吸附吗?
5,讨论叶子的成分分子量分布,基本上不可能。我 敢肯定的说,各种分子量均存在。有植物色素,蛋白质,核酸,叶绿素,多糖,脂类物质,应有尽有。毕竟它已经是高度进化的生物。
我建议:
1,确认聚合体的解离条件,在合适的条件下——尽可能让它解离时作试验。
2,如果作不到,就尽量试验用合适的分子量膜分离。选择的膜的分离“S”形曲线要尽量陡峭。不好的膜无法给出合适的结果,这样的话,你给出的结果只能把别人带到歧路。
等到有准确的结果后,再给你分析。
可以用常规的方法去除蛋白质和杂质,然后进一步分离。
仅供参考。


非常感谢你在深夜为我解答!
1、聚合体分子量到底多大,我真是不清楚,因为它们之间主要以分子间作用力结合;
2、以前也用过膜,主要是中药注射剂除菌,但用膜来进行工艺研究还是第一次。我有疑问的是:买回来的膜都需要用标准品去验证吗?那岂不是将厂家应该做的工作让我们来做了?我的感觉是,正规的产品应该都是有出厂检验的,说到这里,我想到与膜生产厂家联系一下,毕竟,我的膜可都是上万元1支买回来的。
话再说回来,如果是用标准品验证的话,老兄有哪些这方面的经验,比如:常用的标准品、浓度、操作方法等,望指教。
3、如何简单快捷地检验膜是否有吸附?(膜可是装在套子里,看不见)
4、膜分离的“S”形曲线是什么意思?这主要是由膜自身决定的吗?
5、我手头没有万级分子量的膜,我想再买几支小一点的来试一试。
6、等有时间了,我想做几种植物的成分分子量分布,用不同孔径的膜分段截留,干燥每一段,称重,计算百分比,你认为可行否?
再次表示感谢!


1、测试膜截留分子量超滤一般采用相对应分子量的聚乙二醇溶液,看截留率来考察的,这些都应该是膜生产厂家来做的,一般的话,都不会相差太远了,除非膜本身有问题!!2、检验膜有没有吸附,要以收率来计算,就是过膜前后的色素总量的变化;3、对了想请教888wym 老师:膜分离的“S”形曲线是什么意思?4、如果需要万级分子量的膜,可以PM我!!


championchina wrote:
非常感谢你在深夜为我解答!
1、聚合体分子量到底多大,我真是不清楚,因为它们之间主要以分子间作用力结合;
2、以前也用过膜,主要是中药注射剂除菌,但用膜来进行工艺研究还是第一次。我有疑问的是:买回来的膜都需要用标准品去验证吗?那岂不是将厂家应该做的工作让我们来做了?我的感觉是,正规的产品应该都是有出厂检验的,说到这里,我想到与膜生产厂家联系一下,毕竟,我的膜可都是上万元1支买回来的。
话再说回来,如果是用标准品验证的话,老兄有哪些这方面的经验,比如:常用的标准品、浓度、操作方法等,望指教。
3、如何简单快捷地检验膜是否有吸附?(膜可是装在套子里,看不见)
4、膜分离的“S”形曲线是什么意思?这主要是由膜自身决定的吗?
5、我手头没有万级分子量的膜,我想再买几支小一点的来试一试。
6、等有时间了,我想做几种植物的成分分子量分布,用不同孔径的膜分段截留,干燥每一段,称重,计算百分比,你认为可行否?
再次表示感谢!


方便的话,打电话给我。详细了解您的情况后,再给您建议。
我担心我的有些提法把您引导到不合适的途径。
归根到底,我们要用最简单的方法,最小的花费达到您想得到的结果。
之所以要您用标准品检验,那是因为 我拿不准您的膜到底有没有标准,来源如何?
如果有,而且很可靠,您就不必这样做。
您的分子量大小,很简单的办法是用标准品作色谱,一针就见分晓。
“S“形曲线,是指膜的截流是一个相对的概念。不是说10KD的膜,就是10KD以下全部透过,以上全部截流。把截流分子量的百分比和分子量大小做图得到的曲线,就是”S“形曲线。衡量这个标准就是”S“形曲线。
兼解答想卖膜的那位。不过我奇怪的是,你既然卖膜,不会不知道”S“形曲线吧?


大家都是代理国外膜的同行,一起交流讨论,不懂就请教!!只是“S”曲线这个说法比较少听说而已。谢谢888wym老师的指教!!还有想请问888wym
一下,你的膜就比较标准吗?



问个层析仪的问题
1,进口的层析仪除了AKTA 和Bio-rad外还有什么牌子的?实验室规模的,带UV,conductance,可连电脑. pH可带可不带.
2,用的是什么类型的泵,耐多少压.
3,大概多少价格
这里有知道这方面信息的么?谢谢回答


Waters有制备系统,泵耐压较高,更多用于制备反相,中低压用的较少,因为没有必要。PrepLC 300 ml价格估计要2~3万美金,连上检测器一共估计得5万美金。

好像Pall也有中低压层析系统。你可以打听一下


laboy wrote:
问个层析仪的问题
1,进口的层析仪除了AKTA 和Bio-rad外还有什么牌子的?实验室规模的,带UV,conductance,可连电脑. pH可带可不带.
2,用的是什么类型的泵,耐多少压.
3,大概多少价格
这里有知道这方面信息的么?谢谢回答


1,法国的BIOSEPR,也带PH
2,我说不上泵的名字,很古怪的泵,不大,但是很奇妙.如果一定要知道,我再帮您找答案.
3,大小价格不一样; 成交的价格大约: 1~100ml/min系统,60KUSD; 10~1000ml/min,90KUSD.
有兴趣的话,我再给您找资料.


请教:抗血清经硫酸氨沉淀以后,需去除其中的硫酸铵盐,透析相对繁琐。我想采用超滤的方法以达到透析的效果,由此就需要购买一套超滤设备。我对超滤设备所知不多,请帮忙推荐一下,包括泵的选择(应该会用到的吧)、超滤器的选择、膜的选择。需超滤的溶液体积为10L以内,目标蛋白是抗体,IgG的分子量应该是150kd。谢谢!


红红的苹果 wrote:
请教:抗血清经硫酸氨沉淀以后,需去除其中的硫酸铵盐,透析相对繁琐。我想采用超滤的方法以达到透析的效果,由此就需要购买一套超滤设备。我对超滤设备所知不多,请帮忙推荐一下,包括泵的选择(应该会用到的吧)、超滤器的选择、膜的选择。需超滤的溶液体积为10L以内,目标蛋白是抗体,IgG的分子量应该是150kd。谢谢!


选择10KD,或者30KD的膜。
小型0,1Mundefined2PCS
系统包括泵。


biosepq wrote:
Waters有制备系统,泵耐压较高,更多用于制备反相,中低压用的较少,因为没有必要。PrepLC 300 ml价格估计要2~3万美金,连上检测器一共估计得5万美金。

好像Pall也有中低压层析系统。你可以打听一下


没想到biosepq斑竹还在这里回复我的帖子,非常感谢
记得你也是做抗体方面的专家了
不知道你有私下的联系方式么,想私下交流一下,可以pm么?


888wym wrote:
1,法国的BIOSEPR,也带PH
2,我说不上泵的名字,很古怪的泵,不大,但是很奇妙.如果一定要知道,我再帮您找答案.
3,大小价格不一样; 成交的价格大约: 1~100ml/min系统,60KUSD; 10~1000ml/min,90KUSD.
有兴趣的话,我再给您找资料.



888wym兄 有这方面的资料么?
可以发点,非常感谢


laboy wrote:
888wym兄 有这方面的资料么?
可以发点,非常感谢


我找找。然后发过来。


那就谢了


仁兄好,我有一问题想向您请教,我的样品时经过制备HPLC制得的,样品浓度很低,主要含有乙腈、水和0.1%的TFA,我想请教一下,这样的溶液可以直接进行超滤,去除TFA浓缩样品吗?对了,我的样品大概是小分子的多肽,分子量比较小,1000d以上吧。如果直接超滤不行得话,将TFA转化成盐后再进行超滤能够达到去除盐、浓缩多肽的效果吗?如果可以的话应该用什么样的柱子?

我是这方面的新手,对于超滤一点也不懂,提得问题可能有些可笑,请仁兄包涵,并不吝赐教。


proteinwang wrote:
仁兄好,我有一问题想向您请教,我的样品时经过制备HPLC制得的,样品浓度很低,主要含有乙腈、水和0.1%的TFA,我想请教一下,这样的溶液可以直接进行超滤,去除TFA浓缩样品吗?对了,我的样品大概是小分子的多肽,分子量比较小,1000d以上吧。如果直接超滤不行得话,将TFA转化成盐后再进行超滤能够达到去除盐、浓缩多肽的效果吗?如果可以的话应该用什么样的柱子?

我是这方面的新手,对于超滤一点也不懂,提得问题可能有些可笑,请仁兄包涵,并不吝赐教。


不是超滤的问题,是您的产品分子量太小,无法选择合适的膜来进行操作。用1kD对于膜的选择性,比较麻烦,虽然超滤脱盐是经常用到的。或者用1KD的膜,您的多肽损失很大。


laboy wrote:
888wym兄 有这方面的资料么?
可以发点,非常感谢


抱歉。答应您尽快给你资料,但是一直没有。
该产品价格不菲,性能不错。

USD2356 - PKL Systems brochure.pdf (257.96k)


弱弱的问一下,17kD与我们平常使用的单位g/mol怎么换算


我将一个螯合剂与单抗相连,螯合剂的分子量大约500,单抗的分子量是170000,连接以后有什么好的方法可以将它们分开呢?
因为我的单抗很少,一次实验只能投零点几mg,很怕损失,请各位老师给点建议,谢谢

(责任编辑:大汉昆仑王)
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