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蛋白纯化出现沉淀怎么回事?怎么解决呢?

相关实验:蛋白质纯化所需的生物提取物制备的实验

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医往无前791

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3 个回答

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天一湖医者

有帮助

首先需要确定沉淀的诱因:pH值处于等电点附近、高盐下析出还是样品结构的稳定性,当然还有可能是HCP在作祟?

第一种和第二种就比较简单,调整pH值或者盐浓度;第三种情况的话就需要做一些缓冲液的筛选以及添加剂的筛选;HCP的话就考虑增加去除HCP的淋洗工艺

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Eason老歌迷

有帮助

1、是否和其本身的性质有关,例如蛋白表达时,形成的二硫键过多,导致蛋白易聚集沉淀,蛋白为膜蛋白或疏水基团较多,由于疏水作用力聚集沉淀;

2、纯化过程中,需要考虑蛋白所处的环境是否OK。

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未来9

有帮助

可能是

  1. pH发生变化,导致蛋白质沉淀。
  2. 离子溶度过高,缓冲液的离子溶度降低。
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