各种组织特殊染色法—纤维素染色法
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纤维素又称纤维蛋白,在正常的情况下,它是血液内的纤维蛋白原分子聚合而形成的一种特殊蛋白质。正常的组织是见不到纤维素的。但是,当组织受损,血管内皮受到了较为严重的损害,血管通透性随之升高,则可导致大量纤维蛋白的漏出。纤维素性炎症就是以纤维素渗出为主[6]的一种抗损害的症状。在HE感染时于镜下可见到大量红染的纤维素交织呈网状,常可表现为片状红染,质地均匀的物质,常发生玻璃样变。病变常可发生于某些细菌的感染,如白喉杆菌、痢疾杆菌和肺炎双球菌。渗出的纤维素、白细胞和坏死的粘膜上皮等混合在一起,形成一种灰白色的膜状物称假膜。[6]
1.MSB 的改良法:(Martius, Scarlet, Blue methocl)
(1) 试剂 的配制
a液:马休黄(Martius yellow)0.5g
磷钨酸(Phosphoturgstic acid)2.0g
95%乙醇 100ml
b液:丽春红 0.5g
酸性品红 0.5g
冰醋酸 1ml
蒸馏 水 99ml
c液:甲基蓝(Methyl blue)0.5g
冰醋酸 1ml
蒸馏 水 99ml
(2)操作方法:
①切片脱蜡至水。
②1%高锰酸钾氧化切片5分钟,水洗。
③ 2%草酸处理2分钟,水洗。
④天青石蓝液染3分钟。
⑤Mayer氏苏木素染3分钟。
⑥流水冲洗5-10分钟。
⑦ 95%酒精稍洗切片。
⑧ 马休黄液染2分钟。
⑨ 蒸馏水洗。
⑩ b液1%酸性品红染色10分钟。
⑾或1%磷钨酸水溶液处理直至胶原纤维不留下红色。
⑿蒸馏水洗。
⒀1%甲基蓝染色5分钟。
⒁1%醋酸水溶液分化切片。
⒂脱水透明并封固。
结果:早期纤维素:黄色;中期纤维素:红色;晚期纤维素:蓝色;细胞核灰黑色;胶原纤维蓝色;红血细胞黄色。背景:黄色。SARS患者肺部病变可明显显示上述的病理变化。
(3)注意事项:
1.该法是渐进式染色法,先要小分子量的黄色。继用中分子量的红色,再用大分子量的蓝色。染液中的几种染料可以互相替用。
1本法中的MSB即Martius yellow,Brilliant cystal scarlet ,Methyl blue。其中红色染料除了可用猩红外,还可用酸性品红。丽春红等替代。
2蓝色染料中除了甲基蓝外,也可用固绿,淡绿等来替换。
2.本法是显示纤维素的经典方法,有的用PTAH素染纤维素,但效果没有本法好。
(4)应用
1用于各种炎性渗出病病变的观察。在各种细菌的作用破坏下(如白喉杆菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌等)血管内皮受损较重,造成血管壁通透性增高。大量纤维素的渗出,应用此法可观察渗出的情况。
2用于各种病毒损害导致的纤维素渗出。病毒对于血管的损害更大。如SARS病毒损害时,从4例的解剖病例中观察到纤维素的变化,早期时的纤维素较难发现,中期及中晚期的纤维素较多。
③用于全年性弥漫性小血管内凝血(DIC)。风湿性肉芽组织、恶性高血压、全身性结缔组织疾病、肾小球包氏囊内纤维素沉着等疾病的观察[8]。
1.MSB 的改良法:(Martius, Scarlet, Blue methocl)
(1) 试剂 的配制
a液:马休黄(Martius yellow)0.5g
磷钨酸(Phosphoturgstic acid)2.0g
95%乙醇 100ml
b液:丽春红 0.5g
酸性品红 0.5g
冰醋酸 1ml
蒸馏 水 99ml
c液:甲基蓝(Methyl blue)0.5g
冰醋酸 1ml
蒸馏 水 99ml
(2)操作方法:
①切片脱蜡至水。
②1%高锰酸钾氧化切片5分钟,水洗。
③ 2%草酸处理2分钟,水洗。
④天青石蓝液染3分钟。
⑤Mayer氏苏木素染3分钟。
⑥流水冲洗5-10分钟。
⑦ 95%酒精稍洗切片。
⑧ 马休黄液染2分钟。
⑨ 蒸馏水洗。
⑩ b液1%酸性品红染色10分钟。
⑾或1%磷钨酸水溶液处理直至胶原纤维不留下红色。
⑿蒸馏水洗。
⒀1%甲基蓝染色5分钟。
⒁1%醋酸水溶液分化切片。
⒂脱水透明并封固。
结果:早期纤维素:黄色;中期纤维素:红色;晚期纤维素:蓝色;细胞核灰黑色;胶原纤维蓝色;红血细胞黄色。背景:黄色。SARS患者肺部病变可明显显示上述的病理变化。
(3)注意事项:
1.该法是渐进式染色法,先要小分子量的黄色。继用中分子量的红色,再用大分子量的蓝色。染液中的几种染料可以互相替用。
1本法中的MSB即Martius yellow,Brilliant cystal scarlet ,Methyl blue。其中红色染料除了可用猩红外,还可用酸性品红。丽春红等替代。
2蓝色染料中除了甲基蓝外,也可用固绿,淡绿等来替换。
2.本法是显示纤维素的经典方法,有的用PTAH素染纤维素,但效果没有本法好。
(4)应用
1用于各种炎性渗出病病变的观察。在各种细菌的作用破坏下(如白喉杆菌、痢疾杆菌、肺炎双球菌等)血管内皮受损较重,造成血管壁通透性增高。大量纤维素的渗出,应用此法可观察渗出的情况。
2用于各种病毒损害导致的纤维素渗出。病毒对于血管的损害更大。如SARS病毒损害时,从4例的解剖病例中观察到纤维素的变化,早期时的纤维素较难发现,中期及中晚期的纤维素较多。
③用于全年性弥漫性小血管内凝血(DIC)。风湿性肉芽组织、恶性高血压、全身性结缔组织疾病、肾小球包氏囊内纤维素沉着等疾病的观察[8]。