免疫复合物的检测(循环免疫复合物和组织固定免疫复合物)
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免疫复合物在体内存在有两种方式,一是存在于血液中的循环免疫复合物(CIC),一是组织中固定的免疫复合物。免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。在大多数情况下,免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂,所以抗原特异性方法并不常用。
一、循环免疫复合物的检测
根据免疫复合物的物理学、免疫学和生物学特性,已经设计出很多检测CIC的方法(表24-4),本章只述及常用的代表性方法。
表24-4 循环免疫复合物的常用检测方法
一、循环免疫复合物的检测
根据免疫复合物的物理学、免疫学和生物学特性,已经设计出很多检测CIC的方法(表24-4),本章只述及常用的代表性方法。
表24-4 循环免疫复合物的常用检测方法
类别 | 原理 | 方法 | 敏感性 | 备注 |
物理法 | 分子大小 | 1.超速离心 | - | 适于研究 |
2.分子超滤 | - | 适于研究 | ||
3.凝胶过滤 | 30μg | 适于研究 | ||
溶解度 | 1.PEG沉淀 | 20μg | 粗定量,易推广 | |
2.冷沉淀 | - | 定性,临床应用 | ||
补体法 |
固定补体,
结合C1q |
抗补体试验 | 0.1μg | 常用,特异性差 |
1.C1q凝胶沉淀试验 | 100μg | 定性,不易普及 | ||
2.C1q偏离试验 | 4μg | 不易普及 | ||
3.液相法 | 10μg | 不易普及 | ||
4.固相法 | 1μg | 不易普及 | ||
胶固素 | 胶固素结合试验 | 3μg | 敏感,稳定 | |
抗Ig法 | 结合RF | 1.RF凝胶沉淀试验 | 100G | 定性,不敏感 |
2.mRF固相抑制试验 | 1~20μg | 不易普及 | ||
3.PRF凝集抑制试验 | 1~10μg | 不易普及 | ||
结合Ig | 抗抗体法 | 2~3μg | 不易普及 | |
细胞法 | Fc受体 | 1.血小板凝集试验 | 1~4μg | 需新鲜制备 |
2.ADCC抑制试验 | 5~10μg | 细胞活性质控难 | ||
3.Mφ吞噬抑制试验 | 0.03μg | 细胞活性质控难 | ||
补体受体 | 1.Raji细胞法 | 6μg | 需维持细胞株 | |
2.花环抑制试验 | 10μg | 影响因素多 |