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生化与分子生物学技术在生命医学研究中的运用

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生化与分子 生物 学技术
离心技术、电泳技术、层析技术(常压层析与高压层析)、超滤技术…………
生物 大分子定量检测、PCR与RT-PCR技术、基因克隆、DNA亚克隆、DNA测序、基因文库的建立与目的基因筛选、外源基因表达(原核表达与真核表达)、基因转导、转基因、基因剔除、RNAi技术、蛋白质组技术、生物信息学技术…………
•生物大分子的分离、纯化与制备
–离心技术
–电泳技术
–层析技术
–透析技术
–超滤技术
–外源基因表达(原核或真核)
•生物大分子的定性研究
–PCR与RT-PCR
–DNA测序
–蛋白质组学技术
•生物大分子的定量与半定量研究
–紫外分光
–定量PCR
–免疫印迹分析(Western blot)
–定量电泳
–Southern blot 与Northern blot
•基因与蛋白的功能确认
–基因转导
–基因剔除
–转基因
–RNAi技术
–蛋白质组学技术
生命科学与医学研究中问题的提炼
•医学观察、推理(归纳、演绎)或直觉→科学问题
•科学问题→生物化学问题或分子生物学问题
•生化或分子生物学问题→生化或分子生物学技术问题

生化与分子生物学技术在解决生命医学问题中的基本任务
•在某种生物表型、生理状态或病理状态下,是否特异性地产生基因(或蛋白)X ?或者,基因(蛋白)X的生成量是否发生特异性的改变?
•将基因(蛋白)X从研究对象(细胞、组织、器官、实验动物、人体)中剔除,该生物表型、生理状态、病理状态能否得到逆转(或加重)?
•将基因(蛋白)X重新导入研究对象,或增加其生成量,能否重现(或减轻)该生物表型、生理状态、病理状态?

Cell, Vol. 88, 277–285, January 24, 1997, Copyright ©1997 by Cell PressEndostatin: An Endogenous Inhibitor of Angiogenesisand Tumor GrowthMichael S. O’Reilly~undefined Thomas Boehm~undefined Yuen Shing~undefined Naomi Fukai,†George Vasios,§William S. Lane,‡EvelynFlynn~undefined James R.Birkhead,§Bjorn R. Olsen, †and JudahFolkmaundefinedDepartment_of_Surgery_Children’s Hospital, BostonDepartments of Surgery and Cellular Biology Harvard Medical School300 Longwood Avenue Boston, Massachusetts 02115†Department of Cell Biology Harvard Medical School220 Longwood Avenue,Boston, Massachusetts 02115‡Harvard Microchemistry Facility 16 Divinity AvenueHarvard University Cambridge, Massachusetts 02138§OsteoarthritisSciences, Inc. Cambridge, Massachusetts 02139

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