免疫组织化学染色结果评价
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免疫组织化学染色结果评价
对免疫
组织化学染色所得结果的判断要持科学态度，根据对照实验准确判断阳性和阴性结果，排除假阳性和假阴性结果。为使实验结果准确无误，应多次重复进行实验。最后得出科学的结论。为达此目的，首先应学会区别特异性和非特异性染色结果。非特异性染色的特点是：细胞和间质染色无区别或间质染色更强；染色无特定部位，无结构性；染色五分布规律，某一部位均匀着色；染色出现在切片的干燥部位、边缘、刀痕或组织折叠处。排除非特异性染色之后，应确定特异性染色在组织细胞中的部位和程度，并且考虑是否有必要进行半定量测定。
《一》以抗原表达模式定位
1．细胞质内弥散性分布，多数免疫组织化学染色为胞质型阳性反应，如细胞角蛋白(Cytokeratin，CK)和波形蛋白(Vimentin)等。
免疫组织化学染色(SP法。AEC显色)
胚胎12天人员端脑背侧脑室区司见波形蛋L(Vimentin)免疫反应阳性细胞：其胞体位于脑室区。一端伸出长突起到达软脑膜
2．细胞核周边胞质内分布，其判别要点是细胞核轮廓被勾画得很清楚，如CD3多克隆抗体的染色。
3．胞浆内局限性点状阳性反应，如CDI$抗体的染色。
4．细胞膜线性阳性反应，大多数淋巴细胞标志物的染色均如此，如CD20。
5．细胞核阳性反应，如BrdU、Ki-67及雌、孕激素受体蛋白等。
有些抗原的阳性表达可同时出现在细胞的不同部位，如细胞质和细胞膜等。
《二》阳性染色结果定量
1．计算免疫反应阳性细胞数方法是选择每个样品中10个非重叠视野，计算每个视野中的阳性细胞与总细胞数的百分比，取平均数，连续观察和计算至少二个条件相同的样品。得出数据经统计学处理后可在计算机Microsoft Excel中作出柱形图。
2．另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定，一般阳性细胞数在0～25为阴性，25～50为+，50～75为++，75以上为+++。此种判定方法容易出现人为误差，现已很少在论文中出现。
3．图像分析系统检测阳性结果。
