动物染色体标本的制备与观察
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实验原理
实验试剂
实验设备
实验材料
实验步骤
1. 动物按4μg/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,3~4h后杀死动物。
3. 将0.6~1ml 2%柠檬酸钠用1ml注射器接上5# 针头注入骨髓腔,将骨髓细胞先冲入小碟取下注射器针头,反复吸打骨髓细胞,使细胞团块分散,转入10ml离心管。
4. 视骨髓量之多寡加入0.4%KCl溶液8~10ml,随即将离心管置37±0.5℃水浴中低渗15~20min
6. 弃上清液,沿离心管壁缓慢加入新配制的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5ml,加固定液时注意不要冲动细胞团块。
7. 加完固定液后,立即用吸管将细胞轻轻吸打均匀,静置固定20min。如此反复固定2~3次,每次20min。
8. 固定的细胞经离心后,吸取上层固定液,视管底的细胞多寡加入少量新配制的固定液,将细胞团块轻轻吸打成悬液。
9. 在干净、湿、冷的载玻片上滴2~3滴上层细胞悬液,在酒精灯上文火烘干(在空气干燥的地方可不用)。