气相色谱法测定冰片含量

摘要：采用正十二烷作内标，选用OV�101的石英玻璃毛细管柱，建立了某药厂中成药胶囊中冰片含量的气相色谱测定方法。与张亮(1994)、刘柏年(1984)工作相比，不仅大大节约了分析时间，而且分离效果更佳，测定结果的重现性好，标准偏差S=0.40，平均回收率高达99.0%，内标物与冰片的浓度比为1∶0.3～1∶1.5时峰面积与浓度成线性关系，相关系数r=0.9997。
引言：在用文献［1］［2］的方法测定某药厂中成药中的冰片含量时，考虑到原方法的分析时间较长所带来的不便，因此根据冰片(2-莰醇)的极性，选择了弱极性的色谱柱(OV-101)来替代原方法中的中等极性色谱柱(PEG-20M或PEG-2M)，同时将内标物选为正十二烷(原方法为正辛烷或正十七烷)，结果冰片出峰时间提前，内标峰与冰片峰不仅能完全分开，而且相距仅1分钟左右，6分钟即可完成一次分析测定。而原方法中冰片峰与内标峰间隔约7分钟，分析时间长达20分钟。经过多次实验证明，改进后的方法比原方法快捷，而且分离效果更佳。在本文选定的色谱分析条件下，内标物与冰片浓度比为1∶0.3～1∶1.5时峰面积与浓度线性关系，所绘制的标准曲线相关性好，相关系数为0.9997，平均回收率为99.0%，标准偏差为0.4039。因而该方法有较好的精密度和准确度，而且也节约了分析时间。
1、实验部分
1.1、仪器、试剂及测试条件  意大利FISONS公司GC8340-00型气相色谱仪 色谱柱：OV-101石英玻璃毛细管柱，柱长25m，柱径0.32mm 检测器：FID，灵敏度103冰片：化学对照品(中国药品生物制品检定所)正十二烷：色谱纯(上海试剂一厂)内标溶液：将52.5mg正十二烷溶于25ml醋酸乙酯中摇匀备用气流：N250kPa，65ml/min；H235ml/min；Air300ml/min 温度：柱温120℃；进样口180℃；检测器：220℃
1.2相对校正因子的测定及线性范围的确定  精确称取冰片20.18mg、34.91mg、47.13mg、59.00mg、73.81mg于25ml容量瓶中，各精确加入正十二烷约52.50mg作内标，用醋酸乙酯稀释至刻度，溶解后摇匀备用。各精确吸取上述溶液[WTBZ]1ul按1.1的条件测定，绘制标准曲线回归直线方程：y=0.7469x+0.0266 相关系数：r=0.9997 注：WI=内标物质量Ws=样品质量 AI=内标峰面积As=样品峰面积，当内标物与冰片浓度比为1∶0.3～1∶1.5时峰面积与浓度成线性关系。由上述1.2配制的五个标准溶液(各加入52.50mg内标)所测定的气相色谱图，分别求出相对校正因子及其平均值，结果列于表1。冰片的相对校正因子根据下式计算：Ms=样品浓度 As=样品峰面积 Mi=内标浓度 Ai=内标峰面积 表1冰片的相对校正因子测定值 相对校正因子RSD(%)

1.3样品溶液的制备及测定 将药丸研细，精确称取约400mg于10ml具塞玻管中，再准确加入内标溶液3ml，振摇15秒后在离心机上分离，分出的上层清液转入一具塞容量瓶中备用。另加5ml蒸馏水于上述含沉淀的玻管中，于40℃水浴上加热15分钟，再精确加入内标溶液3ml，振摇15秒后，离心分离，分出的上层清液也转入上述容量瓶中备用。最后再精确加入内标溶液3ml于含沉淀玻管中，同法萃取后将分出的上层清液与前两次的合并得样品溶液。精确吸取1ul样品溶液作气相色谱分析。气相色谱图：冰片的右旋峰、左旋峰、内标峰的保留时间分别为4.20min、4.59min、5.32min。
2、结果与讨论
2.1色谱柱的选择根据冰片(2―莰醇)的极性，如选择文献中的中等极性柱(固定液为)PEG-20M或PEG-2M，则冰片与固定液的相互作用较大，因此在柱中滞留的时间长，从而使分析时间较长。本文改用固定液为OV-101的弱极性柱，可使冰片在进样4分钟之后即可出峰，比文献提前了8分钟，并且冰片的左、右旋峰能完全分离，证明柱分离效果良好。
2.2内标的选择：通过多次实验，发现在1.1测试条件下，正十二烷出峰时间为5.30min左右，与冰片峰相隔最近，而正十四烷、正十七烷出峰时间均为6分钟以上，因此正十二烷出峰位置最佳，不仅能与冰片峰完全分离，而且与冰片峰最接近，是理想的内标物。
3、结论

      从绘制的标准曲线以及回收率和精密度数据来看，本方法准确、稳定、重现性好，而且快速、实用，完全能够满足厂家对中成药中冰片含量分析的要求。
参考文献［1］张亮等.气相色谱法测定镇江膏药中冰片和薄荷脑的含量［J］.中国药科大学学报，1994，25(1)：24～25. 
        ［2］刘柏年.冠心苏合丸中冰片含量测定方法的研究［J］.中成药研究，1984(11)：9～10.