气相色谱�质谱联用法测定风油精中樟脑的含量

【摘要】  目的 建立测定风油精中樟脑含量的方法。方法 采用气相色谱�质谱联用方法，以萘为内标物，SPB�1701（30 m×0.25 mm×0.25 μm）石英毛细管柱；80～250 ℃程序升温。结果 樟脑的量在2.56×10-3～12.8×10-3μg范围内与峰面积之比有较好的线性关系（r=0.9998），平均回收率为97.6%，检测限：1.3×10-3μg。结论 方法快速、准确、灵敏度高、重复性好，可用于风油精制剂的质量控制。

【关键词】  气相色谱�质谱法；樟脑；风油精

　　Determination of camphor in Fengyoujing by gas chromatography�mass spectrometry

　　Abstract:Objective To develop a method for the content determination of camphor, the main component in Fengyoujing.Methods Camphor in Fengyoujing was analyzed by gas chromatography�mass spectrometry using naphthalene as internal standard. Camphor and naphthalene were analyzed on a SPB�1701 column with programing temperature from 80 to 250 ℃. Results The linear range of the method was 2.56×10-3~12.8×10-3 μg with a relative standard deviation of 2.5%. The detection limit of camphor was 1.3×10-3 μg.Conclusion  The method is rapid, accurate and reproducible for the quality control of Fengyoujing.

　　Key words:gas chromatography; mass spectrometry; camphor; Fengyoujing

　　风油精主要由薄荷脑、樟脑、水杨酸甲酯等多种药物配以香料制成，具有特殊的香气，味凉而辣，有消炎、镇痛，清凉、止痒、祛风之功效，用于伤风感冒引起的头痛、头晕以及关节痛、牙痛、腹部胀痛和蚊虫叮咬、晕车等引起的不适［1］，还可用于轻度烫伤、脚癣、咽喉肿痛等的治疗。樟脑是风油精的有效成分，目前，对该成分的分析文献报道的主要是采用气相色谱法［2~8］。本文利用气相色谱�质谱联用方法中总离子流质量色谱模式，以萘作内标，对风油精中的樟脑进行含量测定，该方法快速、准确、灵敏度高、重复性好。

　　1  仪器与试药

　　1.1  仪器岛津GC�17A & GCMS�QP5050A气相色谱�质谱联用仪，GC�17A气相色谱（多级程序控温、调压、载气流量控制），二级真空系统（转子泵与涡轮泵），电子电离离子源（EI），四级杆质量分析器，检测分析工作站。

　　1.2  试药 樟脑对照品（中国药品生物制品检定所提供），萘（广州试剂厂，分析纯）,无水乙醇（广州试剂厂，分析纯），风油精（汕头市五环制药厂，批号：060601、060602、060603）。

　　2  试验条件

　　2.1  色谱条件色谱柱：SPB�1701 石英毛细柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；进样口温度：250 ℃ ；升温程序：80 ℃保持3 min，以20 ℃/min升至250 ℃保持2 min；载气：He；流速：1.0 mL/min，柱前压：65 kPa；进样量：1  μL；分流比：30∶1。在该条件下，樟脑对照品的保留时间与样品峰2的保留时间基本一致，进一步通过标准谱库检索得到峰2（图1）为樟脑。

　　2.2  质谱条件电子电离离子源（EI）；电子能量70 eV；传输线温度250 ℃；激活电压1.5 V；质量扫描范围35～500 m/z。

　　3  结果

　　3.1  溶液的制备

　　3.1.1  对照品储备液的制备精密称取樟脑适量，置100 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成每1 mL含樟脑约为0�1 mg的溶液。

　　3.1.2  内标储备液的制备精密称取萘适量，置100 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，配成每1 mL含萘约为0.1 mg的溶液。

　　3.1.3  供试品溶液的制备取风油精约0.04 g，精密称定，置10 mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加入萘储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

　　A.样品   B.阴性样品　1.桉油;2.樟脑;3.薄荷脑;4.水杨酸甲酯

　　图1  风油精的总离子流质谱图（略）

　　Fig.1  Total ion current chromatograms of Fengyoujing

　　3.2   阴性干扰试验按处方比例配制缺樟脑的阴性空白对照溶液，按上述条件测定，测得供试品溶液和阴性对照溶液的总离子流质谱图（见图1），结果在樟脑相同保留时间处，供试品溶液出现对照品色谱峰，阴性对照品无该色谱峰出现，表明阴性对照无干扰。

　　3.3  线性范围和检测限  精密称取樟脑储备液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL于10 mL量瓶中，各精密加入内标储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得系列浓度溶液，各吸取上述溶液1 μL进样测定，每种浓度进样3次，按上述气相色谱与质谱条件分析。以樟脑与萘浓度之比为横坐标，以二者的峰面积之比平均值为纵坐标，得回归方程：Y=1.019X-0.013，r=0�9998，线性范围：2.56×10-3~12.8×10-3μg，检测限：1.3×10-3 μg。

　　3.4  精密度试验取质量浓度为0.012 8 mg/mL的对照品溶液，按上述条件连续进样5次，每次进样1 μL，测得樟脑对照品与萘内标的峰面积之比的RSD=1.6%，结果表明精密度较好。

　　3.5  稳定性试验取批号为060601的样品，按“3.1.1”项方法制备供试品溶液，分别于0、1、2、3、4 h进样1 μL，结果RSD=2.9%，表明样品溶液在4 h内基本稳定。

　　3.6  重复性试验取同一批号(060601)样品5份，分别按“3.1�3”项下方法制备溶液，进样测定，结果樟脑平均质量分数为0.0256 g/g，RSD＝2.5％。

　　3.7  加样回收试验取同一批号（060601）的样品分成6份，每份约0.02 g，置10 mL量瓶中，分别加入上述对照品储备液4 mL（质量浓度为0.128 mg/mL），加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加入萘储备液0.2 mL，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀。按样品测定方法操作，结果回收率为97.6%，RSD为1.8%。结果见表1。

　　表1  风油精中樟脑加样回收试验结果（略）

　　Tab.1  Results of recovery test(n=6)

　　3.8  样品测定取3个批号样品，按“3.1.1”项下方法制备溶液，按上述色谱条件及质谱条件，分别取1 μL进样，测定得到二者的比值，代入线性方程计算樟脑含量。结果见表2。

　　表2  风油精样品测定结果（n=5)（略）

　　Tab.2  Relative standard deviation of sample analysis

　　4  讨论
 
　　4.1  采用GC�MS法测定风油精中樟脑含量，灵敏度高，最小检出限低至1.3×10-3 μg，样品用量小。由于GC�MS法具有谱库检索功能，能快速判断出目标组分，除保留时间定性，还增加了辅助定性手段。

　　4.2  柱温条件选择  分别按下面条件进行测定：①进样口：140 ℃；升温程序：80 ℃保持3 min，以10 ℃/min升至140 ℃；②进样口温度：250 ℃ ；升温程序：100 ℃以20 ℃/min升至250 ℃；③进样口温度：250 ℃ ；升温程序：80 ℃保持3 min，以20 ℃/min升至250 ℃保持2 min，结果发现③分离效果较佳（分离度大于2.0）。

【参考文献】
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