TG-Ab测定操作规程SOP
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一原理
利用人血清中TG抗体与其示踪物125I-TG进行特异结合反应,形成125I-TG-A复合物,然后加入免疫分离剂。复合物被沉淀下来,而游离的示踪物留在上清液中,离心弃上清液,测定沉淀物放射性,即能反映出血清中TG抗体的含量。
二标本采集与处理:样本采集后,应尽快分离血清。
三仪器设备和试剂
1适用仪器:上海核所日环光电仪器有限公司的SN-695型智能放免r测量仪。
2试剂:北京北方生物技术研究所
3测定步骤:
取3聚苯乙烯试管若干,用记号笔编号,然后用微量加样器按下表加样。加样前所有的试剂要平衡到室温并混匀(包括待测样品)。
试剂管别
阴性管
阳性管
待测管
TG抗体阴性血清
10
TG抗体混合阳性血清
10
待测样品
10
TG抗体缓冲液
200
200
200
125I-TG
100
100
100
混匀,任取三管测总T,取均值,37°C温育45分钟。
TG抗体羊抗人免疫分离剂
100
100
100
充分摇匀后,室温放置5-10分钟,3500转/分钟,吸弃上清液,测各沉淀管的放射性计数(p)。
四.结果分析
1.参考值:TG抗体B/T≥30%为阳性。
2.临床意义:可用于自身免疫疾病的诊断。
五注意事项
1收到试剂盒后,尽快存放在2-8°C冰箱中。
2阴性对照管在数据处理时非常重要,要做复管。
3分离剂加前一定要摇匀。
4加样时应避免血清样品间的交叉污染。
5加样前试剂要平衡到室温并摇匀。
六质量控制
1每批测定都使用北京北方生物技术研究所提供的制品做质量控制。
2阳性对照B/N≥35时药盒有效。
利用人血清中TG抗体与其示踪物125I-TG进行特异结合反应,形成125I-TG-A复合物,然后加入免疫分离剂。复合物被沉淀下来,而游离的示踪物留在上清液中,离心弃上清液,测定沉淀物放射性,即能反映出血清中TG抗体的含量。
二标本采集与处理:样本采集后,应尽快分离血清。
三仪器设备和试剂
1适用仪器:上海核所日环光电仪器有限公司的SN-695型智能放免r测量仪。
2试剂:北京北方生物技术研究所
3测定步骤:
取3聚苯乙烯试管若干,用记号笔编号,然后用微量加样器按下表加样。加样前所有的试剂要平衡到室温并混匀(包括待测样品)。
试剂管别
阴性管
阳性管
待测管
TG抗体阴性血清
10
TG抗体混合阳性血清
10
待测样品
10
TG抗体缓冲液
200
200
200
125I-TG
100
100
100
混匀,任取三管测总T,取均值,37°C温育45分钟。
TG抗体羊抗人免疫分离剂
100
100
100
充分摇匀后,室温放置5-10分钟,3500转/分钟,吸弃上清液,测各沉淀管的放射性计数(p)。
四.结果分析
1.参考值:TG抗体B/T≥30%为阳性。
2.临床意义:可用于自身免疫疾病的诊断。
五注意事项
1收到试剂盒后,尽快存放在2-8°C冰箱中。
2阴性对照管在数据处理时非常重要,要做复管。
3分离剂加前一定要摇匀。
4加样时应避免血清样品间的交叉污染。
5加样前试剂要平衡到室温并摇匀。
六质量控制
1每批测定都使用北京北方生物技术研究所提供的制品做质量控制。
2阳性对照B/N≥35时药盒有效。