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电泳仪操作规程SOP

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电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳大类,自由界面电泳不需支持物,如等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等,这类电泳目前已很少使用。

区带电泳需用各种类型的物质作为支持物,常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶?DG薄层等,分子生物学实验中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。

应用电泳法可以对不同物质进行定性或定量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备。下面以DYY-12型电脑三恒多用电泳仪(北京六一仪器厂)为例介绍其使用方法。

1.使用方法

(1)按电源开关,显示屏出现“欢迎使用DYY-12型电脑三恒多用电泳仪…”等字样后,同时系统初始化,蜂鸣4声,设置常设置。屏幕转成参数设置状态,见图一:

U: 0V U= 100V | Mode: STD
I: 0mA I = 50mA |

P: 0W P= 50W |

T: 00:00 T= 01:00 |

其中:左侧大写U: I: P: T: 为电泳时实际值;中间部分显示程序的常设值(预置值)。Mode(模式):STD(标准);TIME(定时);VH(伏时);STEP(分步)
(2)设置工作程序。

用键盘输入新的工作程序。例如,要求工作电压U=1000V,电流I限制在200mA以内,功率W限制在100W以内,时间T为3小时20分,并且到时间自动关掉输出。则操作步骤如下:

①按“模式”键,将工作模式由标准(STD)转为定时(TIME)

模式。每按一下模式键,其工作方式按下列顺序改变: STD®TIME®VH®STEP®STD。

②先设置电压U,按“选择”键,先将其反显,然后输入数字键即可设置该参数的数值。按数字1000,则电压即设置完成。

③设置电流I,按“选择”键,先使I反显,然后输入数字200。

④设置功率P,按“选择”键,先使P反显,然后输入数字100。

⑤设置时间T,按“选择”键,先使T反显,然后输入数字320。如果输入错误,可以按“清除”键,再重新输入。

⑥确认各参数无误后,按“启动”键,启动电泳仪输出程序。在显示屏状态栏中显示Start! 并蜂鸣4声,提醒操作者电泳仪将输出高电压,注意安全。之后逐渐将输出电压加至设置值。同时在状态栏中显示“Run”,并有两个不断闪烁的高压符号,表示端口已有电压输出。

在状态栏最下方,显示实际的工作时间(精确到秒)。

⑦每次启动输出时,仪器自动将此时的设置数值存入“MO”号存储单元。以后需要调用时可以按“读取”键,再按“0”键,按“确定”键,即可将上次设置的工作程序取出执行。

⑧电泳结束,仪器显示:“END”,并连续蜂鸣提醒。此时按任一键可止鸣。

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