不常见革兰阳性菌的快速鉴定方法
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<font><span>病原学检测对于感染性疾病的诊断和治疗非常重要，因此，临床<a target="_blank"><u>微生物</u></a><a target="_blank"><u>实验室</u></a>在医院感染治疗和控制中起到关键作用。目前，大部分临床<a target="_blank"><u>微生物</u></a><a target="_blank"><u>实验室</u></a>采用商品化的鉴定系统鉴定临床分离的<a target="_blank"><u>细菌</u></a>，但是对于一些临床不常见的<a target="_blank"><u>细菌</u></a>，传统的鉴定方法(如革兰染色、<a target="_blank"><u>生化</u></a>反应等)更加实用有效。因此，本文参照CLSI M32-A2文件列举了一些临床不常见细菌的特征和鉴定方法，希望对临床微生物实验室的常规工作有所帮助。</span> </font>
<font><span> </span><span>一. 不常见革兰阳性菌</span> </font>
<font><span> </span><span>1．产单核李斯特菌</span> </font>
<font><span>李斯特菌是一种典型的胞内寄生的革兰阳性短杆菌，共分为2个群，7个种。第一群包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韦氏李斯特菌及西尔李斯特菌；第二群为较少见的格氏李斯特菌和莫氏李斯特菌。其中产单核细胞李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性，且产单核细胞李斯特菌是惟一能引起人类疾病的，是一种人兽共患病的病原菌，能引起人、畜的李斯特菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎、流产和单核细胞增多。这种病菌在自然界广泛存在，食品中存在的产单核细胞李斯特菌对人类的安全具有危险，世界卫生组织(WHO)指出，水产品、奶及奶制品、肉制品均有不同程度的污染，并曾将其列为20世纪90年代食品中四大致病菌之一。</span> </font>
<font><span>产单核李斯特菌是一种革兰阳性短小杆菌，通常成双排列，偶尔可见双球状(见图8)。有鞭毛，但仅在18~20℃有动力，在37℃动力缓慢。无芽胞，一般不形成荚膜，但在含有血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖荚膜。兼性厌氧，对营养要求不高，普通培养基上可生长，在血平板上会形成β-溶血。最适的生长温度是30~37℃，并可在4℃条件下进行冷增菌。本菌耐碱不耐酸，对热较为敏感，加热50℃10min即可死亡同时该菌对多种抗生素敏感，以氨苄青霉素为首选，尚有青霉素、链霉素、四环素、氯霉素和红霉素等敏感。但该菌对磺胺、杆菌肽和多粘菌素耐药。产单核李斯特菌触酶阳性，马尿酸盐阳性。</span> </font>
<font><span> </span><span>2．链球菌属</span> </font>
<font><span>链球菌属细菌广泛分布于自然界、人和动物肠道、<a target="_blank"><u>健康</u></a>人鼻咽部等，致病链球菌可引起各种化脓性炎症、猩红热、风湿热等疾病。本属细菌为革兰阳性球菌，链状排列，无鞭毛，无芽孢，可形成荚膜，在液体培养基中易形成长链，致病性强的菌株多为长链，在脓汁标本中多为短链。本属细菌为需氧或兼性厌氧菌，部分为厌氧菌。营养要求较高，需在加有血液、血清等成分的培养基生长良好。根据链球菌在血液琼脂平板上菌落周围溶血情况，有草绿色溶血环的称为α型溶血，如草绿色链球菌；呈透明溶血环的称为β型溶血，称β溶血性链球菌或化脓性链球菌；也有不溶血的，称为γ型溶血，如肠球菌。根据族特异性抗原将链球菌分A－T 18个族。链球菌属细菌触酶阴性。化脓链球菌(A群) PYR阳性。无乳链球菌(B群) 马尿酸盐阳性，CAMP阳性。草绿色链球菌PYR阴性，LAP阳性，胆汁溶菌试验阴性。肺炎链球菌镜下为革兰阳性球菌，矛尖状，成双排列，在人和动物体内形成荚膜，菌落细小、周围有草绿色溶血环，48小时后，由于菌落自溶，呈现“脐窝状”，Optochin敏感试验阳性，胆汁溶菌试验阳性，菊糖分解试验阳性。</span> </font>
<font><span> </span><span>表2 不常见革兰阳性菌快速鉴定方法 </span> </font>
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<font><span>细菌名称</span> </font>
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<font><span>初步鉴定方法</span> </font>
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<font><span>附加确证试验</span> </font>
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<font><span>备注</span> </font>
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<font><span>路登葡萄球菌</span> </font> |
<font><span>1．革兰阳性球菌，葡萄状排列<br /> 2．触酶阳性<br /> 3．凝固酶试管法阴性</span> </font> |
<font><span>1．PYR阳性(深红色)<br /> 2．多粘菌素B耐药<br /> 3．鸟氨酸阳性</span> </font>
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<font><span>凝固酶玻片法可能阳性</span> </font> |
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<font><span>浅绿气球菌</span> </font>
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<font><span>1．革兰阳性球菌，呈四联球菌或串状排列<br /> 2．触酶阴性<br /> 3．α-溶血</span> </font>
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<font><span>1．PYR阳性<br /> 2．LAP阴性</span> </font> |
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<font><span>产单核李斯特菌</span> </font> |
<font><span>1．细小革兰阳性杆菌<br /> 2．触酶阳性<br /> 3．BAP上窄的β-溶血环<br /> 4．镜下通常翻滚样运动</span> </font> |
<font><span>马尿酸盐阳性</span> </font>
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<font><span>分离自血培养或CSF才有意义</span> </font>
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<font><span>无乳链球菌(B群)</span> </font>
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<font><span>1．革兰阳性球菌，成对或成链排列<br /> 2．触酶阴性<br /> 3．BAP上窄的β-溶血环</span> </font>
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<font><span>1．马尿酸盐阳性<br /> 2．CAMP阳性<br /> 3．兰氏血清分类法为B群</span> </font> |
<font><span>如果不溶血，不要做马尿酸盐试验</span> </font>
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<font><span>咽峡炎链球菌<br /> ("米勒链球菌")</span> </font> |
<font><span>1．革兰阳性球菌，成对或成链排列<br /> 2．触酶阴性<br /> 3．BAP上菌落直径<0.5mm，溶血不定</span> </font>
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<font><span>1．奶油或香草气味<br /> 2．兰氏血清分类法为F群<br /> </span> </font>
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<font><span>兰氏血清分类法也可能为A、C、F或<br /> G群</span> </font>
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<font><span>化脓链球菌(A群)</span> </font> |
<font><span>1．革兰阳性球菌，成对或成链排列<br /> 2．触酶阴性<br /> 3．BAP上明显的β-溶血环，菌落直径>0.5mm</span> </font> |
<font><span>1．PYR阳性<br /> 2．兰氏血清分类法为A群</span> </font> |
<font><span>因为肠球菌也可能溶血，所以应该仔细观察菌落大小和溶血情况</span> </font> |
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<font><span>草绿色链球菌</span> </font> |
<font><span>1．革兰阳性球菌，呈四联球菌或串状排列<br /> 2．触酶阴性<br /> 3．α-溶血或不溶血</span> </font> |
<font><span>1．PYR阴性<br /> 2．LAP阳性<br /> 3．如果α-溶血，胆汁溶菌试<br /> 验阴性</span> </font> |
<font><span>如果镜下不成链状排列，片球菌属为万古霉素耐药，尿气球菌呈四联球菌，为尿路感染致病菌</span> </font>
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