原理
凡有生活力的种子能不断地进行呼吸作用，吸收空气中的O2，同时放出CO2，CO2溶于水生成H2CO3，H2CO3不稳定解离成H+和HCO3－。由于H2CO3不断解离，就使周围介质酸度逐步增加。用BTB测定出酸度的改变。BTB的分子结构式如图：
它的变色范围为pH6.0－7.6之间，它在酸性介质中呈黄色，在碱性介质中呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。
它的变色范围为pH6.0－7.6之间，它在酸性介质中呈黄色，在碱性介质中呈蓝色，中间经过绿色（变色点为pH7.1）。
材料与仪器
玉米 小麦种子
BTB溶液 BTB琼脂凝胶
恒温箱 培养皿 镊子 滤纸 药物天平 烧杯 漏斗 琼脂 BTB 电炉 量筒
BTB溶液 BTB琼脂凝胶
恒温箱 培养皿 镊子 滤纸 药物天平 烧杯 漏斗 琼脂 BTB 电炉 量筒
步骤
一、材料和设备
玉米或小麦种子
恒温箱、培养皿、镊子、滤纸、药物天平、烧杯、漏斗、琼脂、BTB、电炉、50 ml 量筒
0.1%BTB溶液：称取BTB 0.1克，溶解于煮沸过的自来水中，然后用滤纸滤去残渣。滤液若呈黄色，可加数滴稀氨水，使之变为蓝色或蓝绿色，此液长期贮存于棕色瓶中。
1.5%BTB琼脂凝胶：取0.1%BTB溶液40 ml 置于烧杯中，另称取0.5克琼脂，将其剪碎后加入杯中，用小火（电炉）加热并不断搅拌。待琼脂完全溶解，稍稍冷却即可趁热倒入9cm 培养皿中，使之成一均匀的薄层，完全冷却后备用。
二、实验步骤
1．浸种：将待测种子在30℃－35℃温水中浸种5小时左右，以增强种胚的呼吸强度。
2．显色：取吸胀种子10粒，整齐地埋于备好的琼脂凝胶中，注意要将胚埋入凝胶中。将培养皿置于35℃温箱中一小时可见结果，两小时以上结果更为明显。观察种胚周围出现黄色晕圈的是活种子，否则是死种子。
3．计算：逐一数出种胚周围出现黄色晕圈的种子数，并计算出有生活力种子的百分率
玉米或小麦种子
恒温箱、培养皿、镊子、滤纸、药物天平、烧杯、漏斗、琼脂、BTB、电炉、50 ml 量筒
0.1%BTB溶液：称取BTB 0.1克，溶解于煮沸过的自来水中，然后用滤纸滤去残渣。滤液若呈黄色，可加数滴稀氨水，使之变为蓝色或蓝绿色，此液长期贮存于棕色瓶中。
1.5%BTB琼脂凝胶：取0.1%BTB溶液40 ml 置于烧杯中，另称取0.5克琼脂，将其剪碎后加入杯中，用小火（电炉）加热并不断搅拌。待琼脂完全溶解，稍稍冷却即可趁热倒入9cm 培养皿中，使之成一均匀的薄层，完全冷却后备用。
二、实验步骤
1．浸种：将待测种子在30℃－35℃温水中浸种5小时左右，以增强种胚的呼吸强度。
2．显色：取吸胀种子10粒，整齐地埋于备好的琼脂凝胶中，注意要将胚埋入凝胶中。将培养皿置于35℃温箱中一小时可见结果，两小时以上结果更为明显。观察种胚周围出现黄色晕圈的是活种子，否则是死种子。
3．计算：逐一数出种胚周围出现黄色晕圈的种子数，并计算出有生活力种子的百分率
来源：丁香实验
